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721型分光光度计的应用 姓名:周员桢 班级:食品1001班 学号:201007003103 摘要: 紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域, 还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理部门, 紫外可见分光光度计督有广泛而重要的应用。紫外可见分光光度计有着较长的历史, 其主要理论框架早已建立, 制作技术相对成熟。但构成紫外可见分光光度计的光、机、电、算等任何一方面的新技术都可能再推动紫外可见分光光度计整体性能的进步。在追求准确、快速、可靠的同时, 小型化、智能化、在线化、网络化成为了现代紫外可见分光光度计新的增长点。紫外可见分光光度计作为一项产业, 用户的需求是其发展的根本动力, 面向客户、以人为本是设计和制造紫外可见分光光度计应该遵循的法则。本文主要介绍了使用721型分光光度计测定茶叶中的茶氨酸 关键词:721型分光光度计;茶叶;茶氨酸 正文： 1 引言 茶氨酸是茶叶中特有的一种氨基酸, 其含量直接影响到茶叶的品质。自1950年日本学者首次分离出茶氨酸以来, 已经出现多种分析方法图, 如碱式碳酸铜沉淀法、强酸性阳离子交换树脂层析法、荀三酮显色的薄层色谱法、气相色谱法、紫外光吸收光谱法、高效液相色谱法、氨基酸分析仪分析法、凝胶电泳和质谱等多种分析方法。由于茶氨酸没有荧光特性, 紫外吸收又较弱, 通常分析的样品中成分复杂, 特别是含有许多与其性质极其相似的氨基酸, 给分析工作带来了许多困难。在现有的分析方法中, 可见光分光光度法未见报道, 本文研究以可见光分光光度法测量茶叶中的茶氨酸, 直接简便, 排除了茶叶中其他氨基酸的干扰, 取得了较好的结果。 2 实验部分 2. 1 仪器与试剂 721 型分光光度计;6% 碳酸氢钠溶液;茶氨酸标准溶液: 称取105C烘干2h 的茶氨酸标样0.40000g , 加人6.0mol/L盐酸10ml , 在80 C温度下加热回流5h , 然后加人1.0mol/L, NaOH溶液60ml,定容至l000ml。 取上述标准溶液10ml稀释至l00ml即得40ug/ml茶氨酸标准溶液;5 %亚硝酸钠溶液;5g/L次氯酸钠溶液: 取市售次氯酸钠试剂, 用碘量法标定有效氯含量(不低于5.2% ) 后, 用蒸馏水稀释至有效氯含量为5g/L;显色液: 称1.0g可溶性淀粉, 用2ml蒸馏水调匀, 加人100ml沸腾的蒸馏水, 边摇边加热, 煮沸2min,冷却后以定量滤纸滤去不溶物, 加人1.0g氢氧化钠, 摇至全部溶解后, 加人1.0g碘化钾。以上试剂均为分析纯。实验用水为蒸馏水。 2. 2 实验方法 取2 支10ml刻度比色管, 其中一支加人40ug/ml的茶氨酸标准溶液lml和6 %碳酸氢钠溶液4ml, 另一支加人6%碳酸氢钠溶液5ml, 混匀后, 分别加人lml次氯酸钠, 放置lmin后, 加入亚硝酸钠溶液1ml ,混匀放置5min 后, 加人0.5ml显色液, 用6%碳酸氢钠溶液定容至刻度, 充分摇匀后, 立即(2 一10 m in) 以蒸馏水为参比用1cm比色皿在分光光度计上于570nm波长处分别测定其吸光度值Ai、和Ao。, 计算△A=Ai-Ao 3 结果与讨论 3 . 1 吸收光谱 配制40ug/ml的标准溶液, 按实验方法操作, 用分光光度计在490 一690nm范围内测其吸光度△A 3 . 2 条件实验 3.2.1 次氛酸钠溶液加入量的选择 按实验方法, 固定其他试剂加人量不变, 改变次氯酸钠溶液加人量为0.5一1.5ml, 测其吸光度, 结果表明, 次氯酸钠溶液加人量选择lml较好 3.2.2 亚峭酸钠溶液加入量的选择 按实验方法, 固定其他试剂加人量不变, 改变亚硝酸钠溶液加人量为0.5一1.5ml , 测其吸光度, 结果表明, 亚硝酸钠溶液加人量选择lml较好。 3 .2.3 显色液加入量的选择 按实验方法, 固定其他试剂加人量不变, 改变显色液加人量为0.3一0.8ml, 测其吸光度, 结果表明, 显色液加人量在0 .5ml时吸光度△A 最大, 因此本实验选择显色液加人量为0.5ml 3.2.4 显色稳定时间 胺的氯代衍生物能氧化碘化钾而析出碘, 在加人淀粉后, 溶液的颜色即可达到最深, 10min内吸光度稳定。本实验须在10min 内完成测定。 3.3 校准曲线及检出限 在上述选定的实验条件下, 茶氨酸浓度在1.6一10.0mg/ml范围内与吸光度△A 呈线性关系, 线性回归方程为△A=0.0106C-0.1644C (C为10ml溶液中所含茶氨酸的微克数),r=0.9996。11次空白实验测得其标准偏差为S=0.01 , 按IUPAC规定标准计算求得检出限为CL=3