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(3)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是________________。 (4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到________期的细胞用显微镜进行观察。 (5)在细胞培养过程中,通常在________条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中________的活性降低,细胞________的速率降低。 (6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作______进行攻击。 【解析】 这是一道中等难度的综合题,意在考查学生的识记和理解能力。所需的知识点包括动物细胞的培养、癌细胞 的特点、细胞膜的选择透过性等有关知识。动物细胞培养过程中会出现接触抑制、贴壁生长的现象,使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,一般要用胰蛋白酶处理;随着细胞传代次数的增多, 绝大部分细胞分裂停止,进而出现衰老甚至死亡现象,但极少数细胞可连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成不死性细胞,其特点是细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量减少,细胞的黏着性降低;由于活细胞的膜具有选择透过性,在对活细胞进行染色时,大分子染料不能进入活细胞内,故活细胞不能着色;检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜进行观察,因为该时期细胞中的染色体形态、数目最清晰;通常在冷冻(或超低温、 液氮)条件下保存细胞,因为在这种条件下,细胞中的酶活性降低,细胞新陈代谢的速率降低;给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象的原因是机体把移植的皮肤组织当作抗原进行攻击。 【答案】 (1)相互接触 接触抑制 单层(或一层) 胰蛋白酶 (2)衰老甚至死亡 不死性 降低 减少 (3)由于活细胞的膜具有选择透过性,大分子染料不能进入活细胞内,故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性,大分子染料能够进入死细胞内而着色) (4)中 (5)冷冻(或超低温、液氮) 酶 新陈代谢 (6)抗原 考点二 动物细胞融合与单克隆抗体的制备 一、动物细胞融合 1.原理:细胞膜的流动性。 2.诱导融合的因素:聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒、电激等。 【特别提醒】 灭活是指用物理或化学方法使病毒失去感染能力,但是并不破坏这些病原体的抗原结构。 3.意义:最重要的用途是制备单克隆抗体。 二、单克隆抗体的制备 1.过程 2.单克隆抗体的主要优点:特异性强、灵敏度高,并可大量制备。 三、动物细胞融合与植物体细胞杂交的不同 项目 动物细胞融合 植物体细胞杂交 原理 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性及细胞的全能性 诱导 手段 除物理、化学方法外还可用灭活的病毒 物理、化学方法 酶 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 纤维素酶和果胶酶 结果 杂种细胞群 杂种植株 应用 制备单克隆抗体等 培育白菜—甘蓝等 【案例2】 (2009·山东理综)人类在预防与诊疗传染性疾病过程中,经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒,该病毒表面的A蛋白为主要抗原,其疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图所示: 请回答: (1)过程①代表的是________。 (2)过程②构建A基因表达载体时,必须使用__和___两种工具酶。 (3)过程③采用的实验技术是____________,获得的X是_。 (4)对健康人进行该传染病免疫预防时,可选用图中基因工程生产的 _______所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时,可从疑似患者体内分离病毒,与已知病毒进行 ________比较;或用图中的__________进行特异性结合检测。 【解析】 本题用图展示了疫苗的生产和单克隆抗体的制备过程,考察了中心法则、基因工程和动物细胞工程等现代 生物技术。 (1)中心法则中,对于少数的以RNA为遗传物质的病毒,其遗传信息的传递过程需要补充的过程有RNA的逆转录和RNA的复制过程,图中过程①代表的是逆转录的过程。(2)基因工程的步骤是:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定。其中基因表达载体的构建中需要限制酶来切割以获取目的基因,同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端,再通过DNA连接酶连接目的基因和运载体。(3)过程③是将瘤细胞与B淋巴细胞融合的过程,获得的叫杂交瘤细胞,其具备了瘤细胞的无限增殖的特性和B淋巴细胞的产生抗体的特性,从而制备单克隆抗体。(4)本题考查了免疫预防的操作过程,以及欲确诊 疑似患者而采取的方法。本题中提示该RNA病毒表面的A蛋白为主要的抗原,故而可选用通过基因工程生产的A蛋白制备疫苗;确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒,可以进行核酸序列的对比,临床上也可用抗体检测法检查人体是否存
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