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解析: (1)过程①是指利用提取出的RNA反转录成DNA。(2)构建基因表达载体需要用同种限制酶处理目的基因和运载体,使其形成相同的黏性末端,然后用DNA连接酶连接。(3)过程③是利用灭活的病毒或聚乙二醇等方法诱导动物体细胞融合,从而获得既能无限增殖,又能产生单一抗体的杂交瘤细胞。(4)疫苗一般利用处理过的抗原,通过分析流程图可知,转基因产物A蛋白即为免疫所用的抗原,所以可利用A蛋白制备疫苗。检测病毒的方法有多种,最常用的是用基因探针进行检测,比较核酸序列,另外也可用图中获得的抗A蛋白的单克隆抗体与病毒的A蛋白进行特异性结合,从而检测是否含有传染病病毒。 答案: (1)逆(反)转录 (2)限制性内切酶(限制酶) DNA连接酶(注:两空顺序可颠倒) (3)细胞融合 杂交瘤细胞 (4)A蛋白 核酸(基因)序列 抗A蛋白的单克隆抗体 * * * * * * [示例2] 近年高考对本知识点的考查不但频率高,而且难度大,涉及面广。题目多以非选择题形式展开对基因工程操作程序,各环节的目的、结果、原理,目的基因检测与表达等全方位考查,有时与基因结构及必修教材中基因表达相结合命制大型综合题。 (1)图中A是__________;在基因工程中,需要在________酶的 作用下才能完成剪接过程。 (2)在上述基因工程的操作过程中,可以遵循碱基互补配对原 则的步骤有____________。(用图解中序号表示) (3)不同种生物之间的基因移植成功,从分子水平分析,进行 基因工程的主要理论依据是______________,也说明了生 物共用一套______________。 (4)研究中发现,番茄体内的蛋白酶抑制剂对害虫的消化酶有 抑制作用,导致害虫无法消化食物而被杀死,人们成功地 将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米体内,玉米获得了与 番茄相似的抗虫性状,玉米这种变异的来源是__________ ________________。 (5)科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因,并用基因工 程的方法将该基因导入金茶花叶片细胞的染色体DNA上,经 培养长成的植株具备了抗病性,这说明________________。 如果把该基因导入叶绿体DNA中,将来产生的配子中______ (选填“一定”或“不一定”)含有抗病基因。 [解析] (1)基因工程中需要的酶有:限制性核酸内切酶和DNA连接酶,(2)解题的关键点是“可以”遵循碱基互补配对的是。获取目的基因的方法主要有直接分离法和人工合成法,人工合成法包括mRNA逆转录和蛋白质氨基酸序列推测法,人工合成目的基因涉及碱基互补配对。另外,过程②拼接和过程④目的基因扩增和筛选也涉及碱基互补配对。(3)审题有两个方面:①基因移植成功,②从分子水平分析就是要求考虑DNA结构:都是双链结构,碱基都是按照相同的互补配对原则进行配对。外源基因能够在不同生物体细胞内表达,说明基因表达的过程中共用一套遗传密码 子进行翻译,也说明基因表达都遵循中心法则。(5)植株具备了抗病性说明已经产生了相应的蛋白质,从而获得新的性状即基因已经表达。叶绿体中的DNA遗传不遵循孟德尔定律,无法确定是否将目的基因传递给配子。 [答案] (1)运载体(质粒) 限制性核酸内切酶和DNA连 接(2)①②④ (3)不同生物的DNA结构基本形式相同 密 码子 (4)基因重组 (5)目的基因(抗枯萎病的基因)已表 达 不一定 目的基因的“检测”与“表达”的比较 目的基因的检测 目的基因的表达 检测项目 目的基因是否已被导入受体细胞 目的基因是否完成了转录和翻译过程 检测指标 ①检测受体细胞是否表现出标记基因所控制的性状;②用含目的基因的DNA探针检测受体细胞中是否含目的基因片断 检测受体细胞是否表现出目的基因所控制的性状,或合成了与目的基因对应的产物 [特别提示] (1)目的基因与质粒结合的过程可能出现三种情况:目的 基因与目的基因结合;质粒与质粒结合;目的基因与 质粒结合,因此在导入受体细胞后一定要进行检测。 (2)基因成功表达的标志是受体细胞通过转录、翻译合成 相应的蛋白质,而不只是把目的基因导入受体细胞即可。 3.糖尿病是一种常见病,目前对胰岛素依赖型糖尿病的 治疗多用激素疗法。胰岛素过去主要从动物中提取, 基因工程技术发展以后,利用细菌生产胰岛素。其操 作的基本过程如下图所示。 ( ) (1)该工程中, 基因的剪刀是________;基因的针线是________;质粒作为运载体,其基本组成单位是________。 (2)剪取目的基因和剪切质粒时,一般用同一种限制酶切割,这是为了____________________
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