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注
意
加
入
顺
序
提取柱转移至
提取柱转移至
取出提取柱
HCV柱提法样本处理流程图
（适用仪器：PE /Bio-Rad/Mj/Roche）
第 2 页 共 2 页
1*样本：血清或血浆
2*试剂盒中强阳性对照为血清冻干粉，实验时先用250ul DEPC水复溶，混合均匀制成强阳性对照；取25ul强阳性对照加到剩余的DEPC水中，混合均匀制成临界阳性对照
1.5ml灭菌离心管
25ul蛋白酶溶液
200ul待测样本1*/对照2*
变性蛋白，抑制RNase
转移至提取柱
瞬时离心
静置5分钟
振荡15秒混匀
250ul无水乙醇
瞬时离心
56℃温浴15分钟
振荡15秒混匀
200ul裂解工作液
提取柱放入收集管中
6000g离心1分钟
确保提取柱中无残余液体
倒掉收集管中废液
500ul洗液1
柱子重新放入收集管
6000g离心1分钟
倒掉收集管中废液
柱子重新放入收集管
500ul洗液2
6000g离心1分钟钟
倒掉收集管中废液
柱子重新放入收集管
500ul无水乙醇
6000g离心1分钟
倒掉收集管中废液
柱子重新放入收集管
20000g离心3分钟
1.5ml灭菌离心管
彻底去除提取柱中残留的液体
56℃温浴3分钟
（打开提取柱盖子）
1.5ml灭菌离心管
60ul洗脱液
先静置5分钟
20000g离心1分钟
收集滤液
（4℃保存）
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