柑橘黄龙病PCR 检测技术研究.pdfVIP

生 物 灾 害 科 学 2012, 35(2): 164 －168 Biological Disaster Science, Vol. 35, No. 2, 2012 swzhkx@163.com DOI ：10.3969/j.issn.2095-3704.2012.02.009 柑橘黄龙病PCR 检测技术研究 张伟 （信阳师范学院生命科学学院，河南 信阳 464000 ） 摘要：以柑橘黄龙病病原亚洲菌系β-操纵子的特异引物fA2/rJ5 进行PCR 扩增，依据是否有目标DNA 片段的产 生来检测柑橘黄龙病菌的存在与否。该检测技术，具有快速、简便、灵敏等特点，可用于柑橘黄龙病的早期诊断， 对控制该病害的传播具有重要意义。 关键词：柑橘黄龙病；β-operon ；PCR 中图分类号：S436.6 文献标志码：A 文章编号：2095 －3704 （2012 ）02 －0164 －05 Study on PCR Detection of Citrus Huanglongbing Bacterium ZHANG Wei (College of Life Science, Xinyang Normal University, Xinyang 464000, China ） Abstract ：Specific primer pairs fA2/rJ5 based on the β-operon of Candidatus Liberobacter asiaticum was used for PCR detection of citrus Huanglongbing bacterium, The result was depended on whether the target DNA fragment was existed. This PCR protocol is efficient, convenient and sensitive for early detection of citrus Huanglongbing bacterium, which was very important for the control of the spread of the disease. Keywords ：Citrus Huanglongbing; β-operon; polymerase chain reaction 柑橘黄龙病是柑橘上的一种侵染性病害，引起 响果实发育，使柑橘产量降低，品质下降，病情严 柑橘产量、品质下降，甚至导致整株橘树枯死，橘 重时使根系腐烂，影响地上植株的生长，最终导致 园毁灭，给世界柑橘的生产造成极大威胁。20 世纪 橘树死亡[3] 。近年来随着柑橘产业的发展，柑橘苗 初，在我国的华南地区首先发现了黄龙病，以后在 木调用混乱导致该病发生面积有逐年扩大的趋势； 福建、广西、江西、浙江、湖南、四川、云南、海 同时由于全球气候变暖影响，传病虫媒越冬范围扩 南和台湾相继发现[1] 。目前柑橘黄龙病在亚洲、非 大，也使得该病害的发病范围不断扩大。控制本病 洲和美洲地区都有发生，存在三种菌系，即亚洲菌 害的传播主要有三种措施：一.实行严格检疫，防止 系（Candidatus liberobacter asiaticus ）；非洲菌系 带病接穗和苗木的传播。二.建立无病苗木基地，选 （Candidatus liberobacter africanus ）和美洲菌系 种无病苗木。三.铲除病株，防治虫媒介体。这些防 [2] 治方法的有效实施，需要一套快速、灵敏、准确的 （Candidatus liberobacter amerc