利用SSR 和EST-SSR 技术研究不同秋眠级苜蓿遗传多样性.pdfVIP

第 31卷 第 6期 中 国 草 地 学 报 2009年 儿 月 Vo1．31 NO．6 ChineseJourna1ofGrassland NOV．2009 文章编号 ：1673—502l(2009)06—005207 利用SSR和EST--SSR技术研究不同秋眠级苜蓿遗传多样性 于林清 ，刘荣霞 ，苏 东 ，云锦凤 (1．内蒙古农业大学生态环境学 院，内蒙古 呼和浩特 010019； 2．中国农 科学 院草原研究所 ／农业部草原资源与生态重点开放实验室 ，内蒙古 呼和浩特 010010； 3．甘肃省金川集团公司生活服务分公司园林公司，甘肃 金昌 737100；d．内蒙古大学生命科学院，内蒙古 呼和浩特 010021) 摘要 ：用 SSR和 EsT SSR两种分子标记方法相结合 ，对 25份不 秋眠等级苜蓿材料进行遗传多样性分析 。 结果表明：筛选出的7对 SSR引物和 1o对 EsT—SSR引物经PCR扩增后获得 l75条多态性带 ，在此基础上构建了 25份苜蓿材料的SSR和EsT SSRDNA指纹图谱；采用类平均法(UPGMA)Nei氏遗传距离进行聚类，将 25份材 料聚成 4个复合组 ，表 明供试苜蓿材料具有较高的异质性和较丰 富的遗传背景 。 关键词 ：SSR；EST—SSR；苜蓿 ；遗传多样 性 中图分类号 ：S541．O2 文献标识码 ：A 秋眠性是苜蓿的一种生长特性 ，是苜蓿对光照 有可能对决定重要表型性状的等位基因进行直接鉴 及气温变化的一个综合性反应。自2O世纪 3O年代 定 ，从而省去 SSR引物开发过程 中的克 隆和测序 以来 ，国外许多学者就注意到苜蓿 的秋眠性与耐寒 步骤 ，可充分利用现有测序数据 ，降低开发成本 ， 性、再生性、生产力有关… 。美国曾将苜蓿的秋眠性 且在不 同物种 问通用性较好 。本试 验 以 25份 划分为九级标准，并作为全美苜蓿评价和商业化生 不同秋眠等级的苜蓿为材料 ，应用 SSR和 EST— 产的第一评定指标 ¨2]。而苜蓿的秋眠性在品种鉴 SSR标记相结合 的方法进行遗传 多样性分析 ，为 定 、制定种植区划、预测抗寒性、推广及引进品种等 了解其遗传 背景 、指导苜蓿种质 资源 的引进 、利 生产实际中也得到广泛地利用 。随着分子生物学的 用 、遗传改 良、品种鉴定及分子标记辅助选择育种 发展，出现 了 以DNA 变异为基础 的新型遗传标 等提供科学依据 。 记——分子 标 记 。Diwan等 和 Flajoulot等 利 用 1 材料与方法 SSR标记分析 了紫花苜蓿 (M．satiwa)的遗传 多样 性l4一 ；魏臻武利用 SSR、ISSR和 RAPD技术检测 1．1 试验地 自然概况 了苜蓿品种 (系)的DNA分子标记多态性 。 ；Eu— 试验地位于呼和浩特市南郊中国农业科学院草 jayl等证明从截叶苜蓿 EST中开发的 SSR标记可 原研究所沙尔沁试验基地 。地处北纬 40。34、东经 用于苜蓿属其他种的遗传变异分析 ；闫娟等利用 ll1。56，海拔 1065m，属大陆性半干旱气候，干旱、 EST—SSR标记分析了中国北部和中部地区天蓝苜 寒冷、多风沙。年平均气温 5．8～6．3℃ ，7月份极端 蓿的遗传多样性和遗传结构 ]。分子标记已经成为 高温 37．3℃，1月份极端低温 一32．8℃ ，大于 10~C 苜蓿遗传育种研究和种质资源评价的有力工具 。 积温 2700~C以上 ，无霜期 150d左右。年平均降水 SSR (Simplesequencerepeat，简单序列重复) 量 440mm。土壤 为浅色草甸土 ，沙壤 ，有机