生物化学基础-蛋白质代谢.ppt

十、活性肽的合成 定义：在生物体内具特殊生物学功能的多肽称为活性肽如：许多激素、催产素、加压素、舒缓激肽等 合成过程：是从非活性的蛋白质前体经特殊酶加工而成 步骤： 1、内质网合成：由信号肽引入内质网腔，信号肽由信号肽酶水解。 2、高尔基体上进行选择性酶促加工：修饰或调整，将无活性的激素原前体加工成活性肽。 十一、蛋白质合成的阻断剂 一）、抗生素类 如：链霉素、新霉素、四环素等，可用作抗菌药 嘌呤霉素 二）、蛋白质类阻断剂 如：白喉毒素、植物毒蛋白 三）、其他类 如：干扰素、eIF2蛋白激酶等 复习及作业 1.氨基酸脱氨基方式有哪些?哪一种最为常见 2.什么是密码子、反密码子？密码子的特点? 3.蛋白质生物合成过程是什么，以原核生物为例说明！ 4.真核生物与原核生物蛋白质合成的区别是什么 * * 三、核糖体 核糖体是蛋白质合成的场所 （一）核糖体的组成 　60-65%rRNA， 30-35%蛋白质。 （二）核糖体的结构 球形颗粒，大小二个亚基组成。 单位：S 种类 原核生物 真核生物 核糖体大小 70S　18 nm 80S　20-22nm 亚基 50S 　　 30S 60S 40S 种类 23s rRNA 5s rRNA 34种蛋白质 16s rRNA 21种蛋白质 18s rRNA 33种蛋白质 28s rRNA 5.8s rRNA 5s Rrna 50种蛋白质 细胞质部位 与mRNA结合 与质网结合、线粒体、叶绿体 数量/细胞 15000 106-107 参与肽链启动、延长、终止、移动等 mRNA结合位点： 大小亚基结合面上 蛋白质合成位点：P位点和A位点 　　P位点：肽酰-tRNA结合位点，起始-tRNA和肽酰基-tRNA结合位点。 　　A位点：氨酰-tRNA结合位点 还有许多起始因子、延伸因子、 　释放因子及各种酶结合位点 （三）核糖体的功能及位点 四、tRNA的 结构 1.二级结构：三叶草 2. 三级结构：倒“L” 3.与多肽合成有关的四个位点： 反密码子位点 3’末端的-CCA序列 识别氨酰tRNA合成酶的位点 核糖体识别位点。 ATP和酶作用下携带氨基酸 凭借自身反密码子，依靠核糖体的特定位点，以碱基配对方式结合mRNA的密码子 转动特定的氨基酸到核糖体 　　特定部位。 　tRNA的 功能 同功受体RNA：携带相同氨基酸而反密码子不同的一组tRNA 五、氨酰-tRNA合成酶 功能　识别一组（最多６个）同功受体tRNA 反应物：氨基酸、ATP 和 tRNA 特点：专一性、只作用于L-型氨基酸 结构：Ile、Val、Phe、Gln、Thr 六、其他因子 起始因子（initiation factors，IF) IF3 ：阻止30S亚基与50S亚基结合 IF2 ：GTP水解酶的作用 IF1 ：协调IF2、IF3离开小亚基 延伸因子（elongation and initiation factors） EF-Tu、EF-Ts和EF- G三种 热不稳定 ： EF-Tu 作用：使氨酰-tRNA与GTP结合 热稳定： EF-Ts 作用：使 EF-Tu-GTP分解为EF-Tu-GDP 依赖于GTP的EF- G，又称移位因子。 释放因子（release factor，RF） RF1：识别终止密码UAA、UAG； RF2：帮助识别终止密码UAA、UGA； RF1 和RF2 还可使P位上的肽基转移酶转变成 水解酶活性，使肽酰- tRNA进入水相而不去A位，从核糖体上释放。 RF3：协助肽链从P位点释放以及核糖体的分解。 七、蛋白质合成分子机制 翻译过程，需要消耗大量能量，约占全部生物反应总耗能的90% 300多种原料：70多种核糖体蛋白质、20多种活化氨基酸的酶、辅酶、蛋白因子、40多种 tRNA mRNA解读方向：5’ →3’ 肽链延伸方向：从N端向C端进行 部位：细胞质 3’ 合成过程 (1)氨基酸的激活； (2)肽链合成的启动； (3)肽链延长； (4)肽链合成终止释放； (5)肽链折叠和加工。 阶段一：氨基酸的活化 反应酶：氨酰-tRNA合成酶、高度专一、不可逆 反应过程：氨基酸的羧基与相应tRNA的３’端羟基形成酯键。 产物：氨酰-tRNA aa-tRNA合成酶 两步合成氨酰-tRNA 氨酰-tRNA合成酶 + aa + ATP A 氨 基酸-AMP-酶 + PPi + + 阶段二：肽链合成的起始 １、以E.coil为例，起始所需材料： 核糖体30S亚基、50S亚基； 带起始密码的mRNA； fMet- tRNAfMet （N-甲酰甲硫氨酸）； 起始因子（IF1、IF2、IF3）；