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相差显微镜  相差显微镜 •  1940年荷兰学者F.Zernik巧妙地应用光的衍射和 干涉原理提高标本细节的折光率的差异，创造了 相差显微镜(phase contrast m icroscope)。从此 非常简便而有效地观察体外培养细胞的生长过 程，记录细胞分裂周期中的染色体的移动。近年 来细胞学家和生物学家所拍摄的生活细胞生长、 分裂过程的非常出色的记录影片，都是利用相差 显微镜的优秀性能完成的。因此相差显微镜、倒 置相差显微镜已成为细胞学、细菌学、寄生虫 学、免疫学和海洋生物学的实验室必备仪器。 相差显微镜  •  相差显微镜是用于观察组织培养中活细胞 形态结构的。活细胞无色透明，一般显微 镜下不易分辨细胞轮廓及其结构。  •  相差显微镜的特点是将活细胞不同厚度及 细胞内各种结构对光产生的不同折射作 用，转换为光密度差异（明暗差），使镜 下结构反差明显，影像清楚。 相差显微镜的优点 相差显微镜 相差显微镜成像光路 相差显微镜的部件  •  相差显微镜的关键性部件为位相板(phase plate)、环状光阑(anular d iaphragm)和 中心调节望远目镜(centring te lescope)。  • 环状光阑  •  环状光阑是在玻璃片上喷涂金属薄膜借以挡光， 只留下环形透光窄缝的光阑。它能使来自反光镜 的直射光只能从环状部分通过，形成一个空心圆 筒状的光柱，经聚光器并照射到标本以后，就产 生两部分光，一部分是直射光，另一部分是经过 标本后产生的衍射光，这两部分光经物镜内相板 的作用而改变了光的相位和振幅。  •  在相差聚光器下面装有一个转盘，盘上镶有宽狭 不同的环状光阑，在不同光阑边上刻有10×、 20×，40×等字样，这表示当用不同放大倍数的 物镜时，必须配合相应的环状光阑。 环 状 光 栏 相板  •  相板安装在物镜的后焦平面上，带有相板的物镜 称为相差物镜（蔡司厂用红色“PH”表示）。  •  相板上有一灰色的环状圈，称为共轭面。面上涂 有吸光物质，直射光从这部分通过，并吸收了约 80%的直射光，以降低它的透光度。在共轭面的 内，外侧部分称为补偿面，面上涂有减速速物 质，使衍射光的相们发生改变，因此这两者相结 合就能分别改变直射光和衍射光的振幅和相位。 相板分类  •  A型位相板 凡是共轭面即环形相板上涂有吸收 层的相板均为A型。A型相板又分为二型：  •  (1)A十型位相板：这是在共扼面上既涂吸收层又 涂有电解质的相板。这种相板能吸收其共轭面的 60一90％直射光，而透过其20一40％。市场出售 的位相板型号分类时，都以数字表示其透射率和 推迟位相的数据(图10-12，表10—1)。  •  （2）A一型位相板是共扼面上涂有吸收层。同时 在补偿面上涂有电解质。 相板分类  •  B型位相板 凡是在补偿面上涂有吸收层而 在共轭面上有电解质的位相板，均属此 类。  •  (1)B十型位相板是在补偿面上涂有吸收层 共轭面上有电解质的相板。  •  (2)B一型位相板是在补偿面上涂有吸收层 加电解质的相板。 位相板的型号 对焦望远目镜  •  对焦望远目镜(centring te lescope)又叫 合轴望远镜或校正望远目镜。这是一种场 透镜和接目透镜之间的距离可变的目镜。 相差显微镜的成像原理  •  从波动光学的角度可把物体细节即生物标 本的细节，看成是成像光束的障碍物。它 可以改变相干光束的振幅、位相和光强分 布。  •  从变换光学