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淡紫拟青霉NH-PL-03菌株的多糖
及其对尖孢镰刀菌的抑制作用
史怀1,朱育菁1,李芳2,刘波1*
(1福建省农业科学院生物技术研究所,福建 福州350003;2福建省农林大学植保学院,福建 福州350002)
摘 要:提取淡紫拟青霉NH-PL-03菌株的胞内、外多糖,分别以菌丝生长法与孢子萌发法研究其对尖孢镰刀菌的抑制效果。结果表明淡紫拟青霉多糖对尖孢镰刀菌有明显抑制作用。在PDA平板上观察到不同程度的抑制现象,并在显微镜下观察到尖孢镰刀菌菌丝局部膨大,细胞质浓缩,细胞壁消解等现象。淡紫拟青霉多糖对尖孢镰刀菌孢子萌发有强烈抑制作用,并随多糖浓度的提高而增强。
关键词:淡紫拟青霉;多糖;尖孢镰刀菌;抑制作用
中图分类号: 文献标识码: 文章编号:
olysaccharides of Paecilomyces lilacinus strain NH-PL-03
and inhibitory effects to Fusarium oxysporum
SHI Huai1, ZHU Yu-jin1, LI Fang2 ,LIU Bo1*
(1Biotechnology institute,Fujian Academy of Agricultural Sciences,Fujian Fuzhou,350003,China; 2College of Plant Protection,Fujian Agriculture and Forestry University,Fujian Fuzhou,350002,China)
Abstract: Inhibitory activity of PLP (polysaccharides of Paecilomyces lilacinus) were tested against Fusarium oxysporum and results showed that PLP had strong inhibitory effects. Microscopically observed, the hyphae were altered in morphology, including necrosis of the hyphal wall, concentration and leakage of the cytoplasm. PLP also inhibited the spore germination of Fusarium oxysporum. The higher the concentration of PLP, the stronger the inhibitions were.
Key words: Paecilomyces lilacinus; polysaccharide; Fusarium oxysporum; Inhibitory effects
尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum Schl.)可导致多种作物枯萎病,是一种世界性分布的土传病源真菌,造成重大的经济损失。一直以来,化学防治是控制土传病害的主要手段,但化学农药的大量使用导致环境污染、农药抗性和残留等多种问题,而且还目前没有能有效控制镰刀菌枯萎病的化学农药。因此,其生物防治已经成为当前的研究方向[1]。
淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus (Thom.) Samon广泛分布于世界各地,具有功效高、寄主广、易培养等优点,特别在控制植物病原线虫方面功效显著[2]。相关研究,此菌对多种植物病原真菌、细菌乃至病毒具有活性。本实验室筛选到一株对尖孢镰刀菌具有抑制作用的淡紫拟青霉菌株NH-PL-03,对抗性物质进行了初步的筛选分析,结果其胞外粗多糖具有抑菌活性[]。
淡紫拟青霉胞内、外多糖对尖孢镰刀菌的抑制作用作物枯萎病防治的。
1 材料方法
1.1.1 供试菌株 淡紫拟青霉NH-PL-03菌株,从感染根结线虫的番茄植株根围筛选分离得到;尖孢镰刀菌F-H.6.5-030318-J2菌株,从枯萎病的番茄植株根围筛选分离得到。1.2.1 淡紫拟青霉多糖的提取 淡紫拟青霉菌株液体培养基培养7天后,8000r/min离心将菌丝与发酵液分开,发酵液中即为胞外物质,菌丝经超声波充分破碎后离心取上清即为胞内物质。胞内、胞外物质均加入3倍体积的无水乙醇,静置过夜后离心取沉淀,依次用丙酮、乙醚洗涤数次,干燥得粗多糖。粗多糖溶于弱碱中,Savage法脱蛋白后去离子水透析48h除去小分子物质,乙醇沉淀,洗涤,干燥,得半纯品多糖。
1. 淡紫拟青霉多糖的部分理化性质 取少量胞内、外多糖粉末,观察在水、酸、碱以及常见有机溶剂中的溶解性。取多糖溶液,进行紫外-可见分光光度计全波长扫描;分别测定与蒽酮试剂、α
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