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专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
(时间:30分钟 满分:50分)
考查知识点及角度 难度及题号 基础 中档 稍难 培养基成分、类型及配制 1、2 无菌操作技术 5 6 菌种的接种与纯化技术 3、4 7 8 一、选择题(每小题4分,共20分)
1.不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中,不正确的是( )。
A.氮源物质为该微生物提供必要的氮素
B.碳源物质也是该微生物的能源物质
C.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质
D.水是该微生物的营养要素之一
解析 该微生物以CO2为唯一碳源,但CO2不能为微生物提供能量,不属于能源物质。
答案 B
2.下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述,错误的是( )。
A.操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌
B.将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯
C.待培养基冷却至50 ℃左右时进行倒平板
D.待平板冷却凝固约5~10 min后将平板倒过来放置
解析 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板,不能颠倒。牛肉膏容易吸潮,所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后,用玻璃棒取出称量纸。待培养基冷却至50 ℃左右时,用手触摸锥形瓶刚刚不烫手,并且培养基处于溶化状态时进行倒平板。平板冷却凝固约5~10 min后还需倒置。
答案 A
3.下列有关平板划线操作正确的是( )。
A.使用已灭菌的接种环、培养皿,操作过程中不再灭菌
B.打开含菌种的试管需通过火焰上方灭菌,取出菌种后需马上塞上棉塞
C.把皿盖打开,将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线即可
D.最后将平板倒置,放入培养箱中培养
解析 考查平板划线操作。平板划线操作时要时刻注意两个问题:一是防止杂菌污染;二是要尽可能地将菌种分离。
答案 D
4.下列有关稀释涂布平板法,叙述错误的是( )。
A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释
B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面
C.适宜条件下培养
D.结果都可在培养基表面形成单个的菌落
解析 稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。用不同稀释度的菌液接种,只有在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物被分散成单个细胞,才能够在培养基表面形成单个菌落,而不是所有培养基上均可出现单个菌落。
答案 D
5.为了保持菌种的纯净,需要进行菌种的保藏,下列有关叙述不正确的是( )。
A.对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法
B.临时保藏的菌种一般是接种到试管的斜面培养基上
C.临时保藏的菌种容易被污染或产生变异
D.对于需要长期保存的菌种,可以采用低温-4 ℃保藏的方法
解析 对于需要长期保存的菌种,可采用甘油管藏法,即在3 mL甘油瓶中加入1 mL甘油后灭菌,将1 mL菌液转移到甘油瓶中,与甘油充分混匀后,放在-20 ℃的冷冻箱中保存。
答案 D
二、非选择题(共30分)
6.(10分)大肠杆菌通常容易居于人的结肠中,对人体无害,但某些菌株能造成尿路感染和腹泻。请回答下列问题。
(1)在大肠杆菌培养过程中,除考虑营养条件外,还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点,因此常作为遗传学研究的实验材料。
(2)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养器皿进行______(消毒、灭菌);操作者的双手需进行清洗和______(消毒、灭菌);静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能________________。
(3)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数,要想使所得估计值更接近实际值,除应严格操作、多次重复外,还应保证待测样品稀释的______。
(4)通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的______________________________________________________。
(5)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_____________________________________________。
(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过______处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。
解析 本题主要考查微生物培养的综合知识。消毒一般只是消灭体表的微生物,而灭菌是杀灭所有的微生物及孢子等。观察细菌等微生物的有无通常是通过培养来观察菌落的形状、颜色等。
答案 (1)温度 酸碱度 易培养 生活周期短 (2)灭菌
消毒 损伤DNA的结构 (
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