酒醅微生物+45提取预处理方法研究.pdfVIP

第 卷第 期 四川理工学院学报 自然科学版 年 月 文章编号 酒醅微生物 提取预处理方法研究 沈才萍 李德林 沈才洪 邓 波 沈小娟 敖宗华 泸州老窖股份有限公司 四川 泸州 四川理工学院生物工程学院 四川 自贡 国家固态酿造工程技术研究中心 四川 泸州 摘要浓香型白酒的酒醅中含有大量的单糖寡糖多糖色素有机酸和腐殖酸等有机杂质严重 影响对酒醅中微生物进行相关分子生物学研究 如何通过预处理方法降低杂质的影响快速成功提取 高质量的直接影响整个分子生物学实验的准确性 实验采用无菌水缓冲液 缓冲液分 别对酒醅样品进行预处理 通过对样品浓度纯度丰度等指标的比较确定了 预处理法为 最佳预处理方法 关键词浓香型白酒酒醅预处理 中图分类号 文献标志码 品中水溶性杂质还能减少微生物在预处理中的丢失 引 言 间接法提取是通过梯度离心离心洗涤等步骤出去样品 运用分子生物学相关方法对固态酿造食品中微生 杂质然后再收集菌体该过程容易造成微生物种类和 物进行分子生态分析 不仅能克服经典培养方法对微 数量的丢失但能够得到较高质量的 根据环境样 生物群落结构特征信息研究丢失的局限还可以更加可 品的差异采用合适的预处理方法能够保证实验的顺利 靠快速地获得发酵过程中各种微生物的菌落指纹特 进行 在此本实验研究了不同预处理方法以获得一 征确定微生物的多样性及其分类地位 对食品发酵进 种适合酒醅环境中微生物总提取预处理的方法 行微生物分子生态研究首先是需要获得高质量微生物 材料与方法 总 所以发酵食品微生物总提取是进行后 续分子生物学研究的第一个技术难点 能否快速成功 实验材料 获得样品的总获得的总质量的高低直接影 酒醅样品采集于泸州老窖罗汉基地浓香型白酒窖 响整个后续实验的成败 在富含多糖盐淀粉腐殖 池 取样后迅速置于 冰箱保藏备用 酸和代谢色素酚等杂质的酒醅环境中提取微生物总 主要试剂与仪器 这些杂质不易与样品分离而它们的存在会 试剂蛋白酶 上海生工生物工程技术服务有限 抑制聚合酶活性导致后续分子生物学实验失败 公司 无菌水缓冲液 缓冲液 环境样品总预处理方法可概括为两类直接 仪器仪美国 电泳仪美国 法和间接法直接法是先用溶液溶解样品中的杂质通 高速离心机 日本 核酸蛋白检测 过反复离心等方法获得样品沉淀该操作能除去环境样 仪德国 收稿日期 基金项目四川省科技支撑计划项目 作者简介沈才萍 女四川泸县人高级工程师主要从事浓香型白酒生产管理及科研方面的研究 第 卷第 期 沈才萍等酒醅微生物提取预处理方法研究 酒醅预处理