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磁场对酪氨酸酶活性及其催化有机物影响的研究 06生物技术2班 郑楠 　引言( Introduction) 近年来,磁场对生物膜法或酶法(如酪氨酸酶、漆酶等)处理废/污水,特别是有毒含酚废水影响的研究日趋活跃。生物膜水处理方法主要是利用微生物新陈代谢过程中的酶体系催化降解有机污染物. 磁场作用能提高微生物的生物酶活性,增加污泥中微生物对废水有机污染物的吸附和利用能力,提高污水的生物净化效果.但目前水处理中磁效应研究多限于宏观磁效应,对涉及酶效应特别是离体酶磁效应研究的很少. 研究历史 ?马贵斌等(1995)研究了磁化杯(磁场强度约30mT)和流体磁化器(磁场强度约300mT)对TYR催化DL23, 42二羟基苯丙氨酸活性的影响. ?Wada等(1992)将TYR固定在磁铁矿上处理含酚废水,发现可显著提高酶的贮存稳定性和操作稳定性,使酶反应器得以长期运行. ?Yan等( 2006)通过添加磁粉制备磁性固定化TYR,发现磁性固定化TYR 的活性比固定化TYR的活性提高了18% ,对100mg·L - 1苯酚模拟废水的酚去除率分别为42%和50%. ?马逸龙采用生物传感器测定了H场磁化水对细胞内酪氨酸酶的活性影响． 什么是酪氨酸酶? 酪氨酸酶(Tyrosinase,简称TYR)又称多酚氧化酶,普遍存在于细菌、真菌等微生物以及动植物和人体中,是催化与生物体内黑色素的形成有关的一种含铜氧化酶。在活性污泥甚至土壤中腐烂的植物残渣上都可检测到它的活性;它可直接利用水中溶解的分子氧使酚类有机物氧化为相应的醌,醌聚合形成不溶物质而从废水中被除去. TYR也是酶法水处理的主要用酶,因此, TYR 磁效应的研究对含酚废水处理应用有着重要意义.磁场对酶的影响较为复杂,磁场类型、磁场强度等因素不同均可能导致不同的结果或结论. 实验方法与原理 本片关于磁场对酪氨酸酶活性及其催化有机物的影响有哪些? 磁场强度对TYR活性的影响 磁化时间对TYR活性的影响 磁场对TYR温度和酸碱稳定性的影响 磁场对TYR催化反应米氏常数的影响 磁场对TYR荧光光谱的影响 磁场对TYR催化降解不同酚类有机物的影响 两种磁场磁化器对酪氨酸酶催化底物 DL-3,4-二羟基苯丙氨酸活性的影响 1　磁场强度对TYR活性的影响 2　磁化时间对TYR活性的影响 3　磁场对TYR温度和酸碱稳定性的影响 4　磁场对TYR催化反应米氏常数的影响 5　磁场对TYR荧光光谱的影响 6　磁场对TYR催化降解不同酚类有机物的影响 ①磁化TYR对催化降解不同酚物质反应时间的影响 ② 磁化处理TYR对催化去除苯酚和2, 4 - 二氯酚的影响 7两种磁场磁化器对酪氨酸酶催化底物 DL-3,4-二羟基苯丙氨酸活性的影响 　结论(Conclusions) 1) 在10～350mT恒弱磁场作用下TYR催化活性均有提高, 150mT磁场下酶活上升最大,增幅为27. 1%;一定磁化时间内可使酶活上升,超过60min后,酶活增加量减少,磁化酶活上升无规律性,显示了酶磁效应的复杂性. 2) TYR磁化后对温度的稳定性增强,对pH值的适应范围加宽.3) TYR的荧光发射光谱强度随磁场强度和磁化时间而增强(光谱峰未移动,峰形无明显变化) ,表明酶的构象发生了改变. 4) TYR对邻苯二酚、苯酚、2, 42D的催化降解反 应速度依次下降;磁场作用可促进TYR对酚类有机 物的转化,磁化对邻苯二酚反应的促进作用尤其明 显. 磁化处理后酶对不同浓度的苯酚、2, 42D的去除 率都有相应提高,酚去除率上升幅度随酚浓度增大 而升高;酶用量增多,酚去除率提高,且磁化处理的 酶对苯酚和2, 42D的去除率高于未磁化处理的酶. 结果显示,恒弱磁场作用有利于水中苯酚和2, 42D的 去除. 5)不同类型的磁场作用对酪氨酸酶的活性和理化性质影响不同. 磁场的作用使酶分子的构象或活性中心的金属离子的性质发生了变化,这种变化使酶的活性处于高度的激活状态,使底物与反应催化中心的亲合力下降,结合作用调整在适中的程度,使反应的底物容易离去,则反应速度快. 谢谢大家 中文参考文献:?程江,张凡,海景,等. 2004. 聚丙烯填料的生物亲和亲水磁化改性对其润湿及挂膜性能的影响[ J ]. 化工学报, 55 (9) : 1564—1567?李红,胡道道,房喻,等. 2005. 磁场对大分子影响的研究进展[ J ]. 高分子通报, 10: 105—113?刘和. 2003. 芳香烃化合物的微生物降解及基因工程菌的构建[D ].杭州:浙江大学, 2—8 ?马贵斌,杨频,张俊莲. 199