基因工程菌的发酵条件研陆国瑾.pdfVIP

第 卷 第 期 北 京 轻 工 业 学 院 学 报 年 月 祀 基 因工程菌 的发酵条件研 究 陆 国瑾 北 京轻 工 业 学院化 学工程 系, 北 京 摘 要 为 了获得 商品化基 因工程产 品 , 要求所选 用 的基 因工 程 菌 高效表 达 重 组 蛋 白 然 而 , 随着发酵规模 的扩 大 , 诸 多因素影 响基 因工程 菌蛋 白 的表达 成 功 的 大 规模发 酵有 两个 问题是重要 的 一是质粒 的稳 定性 , 二是 高密度发 酵 本 文 从理 论 、 、 上 阐 明 了 , 温度 溶氧 比生 长速率等条件 对 重组 蛋 白产生 影响 的研 究进展 关键词 基 因工程 菌 质拉 启 动 子 阻遏 蛋 白 分类 号 遗传工程 菌 的发酵是一理 沦和 实验 技巧都很 高 的课题 由于 它有 不 可 估量 的前 景 , 全 世 界都在 深入研 究 和 探讨 随着 重组 技术 的深人研 究 , 许 多真 核 生 物 的蛋 白可 以 由细 菌 和 酵母 发 酵产 生 目前 , 基 因工程 这一 高科技 手段在 医药 , 食 品和化 工 等领 域 迅 速 运 用 , 为 用微 生物 合成及 商 品化 生产外 源 蛋 白展示 出广 阔前景 为 了获得 适于 商 品化基 因工程 产 品, 要 求所选用 的重组 菌必须 具 备 两 个 条件 , 即高表 达 水平和 高密度发 酵 然 而 由于 高密度培 养对重组 菌有种种 影 响, 常令 研 究者 面 临诸 多 困难 其 中 以质粒 的稳 定性和培 养条 件 的选 择对重 组 菌生 长 的影 响更重要 和更 直接 质粒 的不稳定性 质粒 的不稳定性基 本上 是 随机 的, 主要 由以下三 种原 因引起 分 离不稳定性 在细 胞分裂 时 , 由于 质粒在 子代细胞 中分配不 准确而 导致 完全 的质 粒 丢 失 , 结 果 产 生无 质粒 的细 胞 值得注 意 的是 , 这种 不 稳定性 常 出现在 两种 情 况 , 一 是传 代 质 粒 只 在 许 多世 代 之后 才 明显产 生 丢失 二是 带有质粒 的细胞 与无质粒 细胞 有 不 同的生 长 速 率 外 源 基 因载 体 的存在 犹如 细胞 内存在 多拷 贝 的质粒 一样 , 对宿 主是 一种代谢 负担 当外 源基 因大量产 生特异 蛋 白时 , 这 种代 谢压力 就 变得更加 严重 一般条件 下 , 带有重组 质 粒 的宿 主 菌 的生 长