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2013高考生物 必考题型早知道 专题14 酶的应用和生物技术在其他方面的应用（学生版）新人教版 考点突破 考点一植物组织培养技术 1．理论基础和基本过程 当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。基本过程如下： 2．影响因素 (1)内因：不同的植物组织，培养的难易程度差别很大，容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。 (2)外因：无菌、营养物质、植物激素(注意使用的先后顺序)和环境因子(pH、温度、光照)等 植物茎的组织培养与花药植株培养 菊花茎的组织培养 月季的花药培养理论依据 基本过程 影响因素 pH、温度、光照等 选择材料 (生殖细胞) 操作流程 制备→外植体消毒→→培养 →移栽→栽培 选材→消毒→和→筛选和→移栽→栽培选育 下列有关植物组织培养的叙述，正确的是.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工 种子 D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得 (1)实验原理：①固定化酶不溶于反应液中，易于回收，可以重复使用。②固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定于一定空间内的技术。 (2)直接使用酶、固定化酶、固定化细胞的比较 方法 优点 缺点 直接使用酶 催化效率高、耗能低、污染低 对环境条件非常敏感、易失活；难回收，成本高，影响产品质量 固定化酶 既能与反应物接触，又能与产物分离；可以反复利用 不利于催化一系列的酶促反应 固定化细胞 成本低、操作容易 反应物不易与酶接近，尤其是大分子物质，反应效率较低 固定化技术的比较 方法 定义 适用范围 模型 包埋法 将酶包裹在多孔的载体中。常见的载体有明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等 多用于细胞的固定 化学结合法 将酶分子或细胞相互结合，或将其结合到载体上 多用于酶的固定 物理吸附法 将酶吸附到固体吸附剂的表面。固体吸附剂多为活性炭、多孔玻璃等 (3)制备固定化酵母细胞取得成功的关键 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，如果浓度过高，将很难形成凝胶珠，如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少，都会影响实验效果。溶化海藻酸钠时要用小火或间断加热，避免海藻酸钠发生焦糊。 2、植物有效成分的提取几种物质的提取方法、原理及步骤 提取方法 提取原理 步　骤 血红蛋白 凝胶色谱法、电泳法 ①根据相对分子质量的大小；②各种分子带电性质差异以及分子本身大小、形状的不同 ①样品处理②粗提取 ③纯化 ④纯度鉴定 玫瑰精油 水蒸气蒸馏法 利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来 ①水蒸气蒸馏 ②分离油层 ③除水、过滤 橘皮精油 压榨法 通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油 ①石灰水浸泡、漂洗； ②压榨、过滤、静置；③再次过滤 胡萝卜素 萃取法 使提取物溶解在有机溶剂中，蒸发后得到提取物 ①粉碎、干燥 ②萃取、过滤 ③浓缩 DNA 盐析法 ①DNA在不同浓度 的NaCl溶液中溶解不 同；②DNA不溶于 酒精，但某些蛋白质 则溶于酒精 ①溶解在2 mol/L的NaCl溶液中；②加水稀释NaCl溶液至0.14 mol/L使DNA析出、过滤；③加入冷却酒 精析出DNA (2)DNA粗提取与鉴定 ①哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，不适于作为 DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。 ②实验过程中两次用到蒸馏水：第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破，释放出DNA，第二次目的是稀释NaCl溶液。 ③鉴定DNA：加入二苯胺试剂并沸水浴加热，观察是否出现蓝色。 (3)血红蛋白的提取和分离操作程序 ①样品处理：红细胞的洗涤(除去血浆蛋白等杂质)、血红蛋白的释放(使红细胞破裂，血红蛋白释放出来)、分离血红蛋白溶液(经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来)。 ②粗分离——透析：除去样品中相对分子质量较小的杂质。 ③纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化。 ④纯度鉴定：一般用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，来鉴定蛋白质的纯度。 (4)植物有效成分的提取方法 ①蒸馏法：芳香油具有挥发性，把含有芳香油的花、叶等放入水中加热，水蒸气能将挥发性较强的芳香油携带出来，形成油水混合物；冷却后，油水混合物又会重新分成油层和水层，除去水层便得到芳香油。 ②萃取法：需将植物材料浸泡在乙醚、石油醚等低沸点的有机溶剂中，使芳香油或色素充分溶解，然后蒸发出低沸点