盐酸度洛西汀肠溶片在健康人体内的药代动力学研究.docVIP

HPLC-MS/MS法测定人血浆中度洛西汀浓度及 其肠溶片的人体药代动力学研究 秦永平﹡，勾忠平，喻颜，苗佳，南峰，王颖 （四川大学华西医院国家药物临床试验机构临床药理研究所，成都610041，电话 028 摘要: 目的 研究健康受试者口服盐酸度洛西汀肠溶片后的体内药代动力学特征。 方法 20名健康受试者，男女各半，进行盐酸度洛西汀肠溶片单次和多次口服给药药动学实验。采用HPLC-MS/MS法测定血浆中盐酸度洛西汀浓度，DAS2.0进行药动学模型拟合和参数计算，SPSS17.0软件进行统计分析。 结果 盐酸度洛西汀肠溶片体内药动学符合一室开放模型，低、中和高剂量单次给药主要药动学参数如下：实测值计算的平均Cmax分别为13.85±7.37、29.86±13.87和44.47±21.80 μg·L-1，Tmax分别为7.60±3.47、6.80±1.40和6.80±1.40 h，统计矩计算的平均t1/2分别为13.93±6.88、11.57±2.34和12.19±1.73 h，AUC0-t分别为268.15±204.6、531.02±385.13和843.53±634.50 μg/L·h。连续给药的主要药动学参数Cmax、Cmin、Cav、Tmax、t1/2和AUC0-t分别为47.37±23.59 μg·L-1、19.47±10.55 μg·L-1、33.09±17.11 μg·L-1、6.57±1.59 h，13.90±2.80 h和1130.60±681.6 μg/L·h。结论 盐酸度洛西汀肠溶片在20~60 mg剂量范围内呈线性动力学特点，主要药代动力学参数无性别差异，多次给药体内无明显蓄积作用。 关键词HPLC-MS/MS 度洛西汀（duloxetine，DLX）是一种5-羟色胺和去甲肾上腺素双重再摄取抑制剂（SNRI）。该药临床上主要用于治疗严重抑郁性障碍。还可治疗女性压力性尿失禁和减缓纤维肌痛。自2004年在美国得到批准后，已经在全球范围内得到了广泛使用。本文采用HPLC-MS/MS法测定健康人血浆中度洛西汀浓度，对健康人口服盐酸度洛西汀肠溶片后的药代动力学进行研究。旨在为该药的临床研究提供有效依据和合理方案。 1实验部分 1.1 试验对象与试验设计 1.1.1 试验对象 本试验方案经四川大学华西医院医学伦理委员会批准后实施。采用单中心、开放试验，筛选20名健康受试者，男女各半。年龄18~24岁，体重指数在19~24范围内，进行病史查询和实验室检查（包括血常规、尿常规、血液生化学、心电图检查和乙肝表面抗原性）正常，无不良嗜好。并签署知情同意书。 1.1.2 试验设计 单次给药组10名健康受试者，男女各半，在三个周期内分别依次在禁食10小时后，次日晨统一空腹服用低（20 mg）、中（40 mg）和高（60 mg）三个剂量盐酸度洛西汀肠溶片，清洗期 为1周。于给药前（0 h）和给药后1，2，4，5，6，7，9，12，15，24，36，48，72 h 取静脉血3 mL，肝素抗凝，离心10 min（3000r/min），分取血浆置-80℃冰箱中保存待测。多次给药组10名健康受试者，男女各半，每日晨给药一次，每次60 mg，连续服药到第7 天。在开始用药前采集空白血样以及第5、6、7天早上服药前采集谷浓度血样，第7天晨用药后按照单次给药的采血时间点采集血样，并分取血浆置-80℃冰箱中保存待测。受试者于试验前1日和试验期间均不饮用酒类、咖啡类饮料和果汁，禁止剧烈活动、吸烟，禁服一切非试验药物。 1.2 血药浓度测定及数据处理 1.2.1 仪器与色谱、质谱条件 HPLC-MS/MS联用仪（包括LC-10AVP高效液相色谱仪，日本岛津公司； API-3000三重四级杆串联质谱仪，Analyst 1.4色-质联用工作站，美国AB公司）。分析柱为Phenomenex Gemini C18 110A（50×3.0 mm，3 μm），柱温40℃。流动相为5 mmol·L-1醋酸铵-甲醇（38:62，V/V，含0.05 %甲酸），流速0.2 mL·min-1。雾化气9 V，气帘气7 V，碰撞气7 V，喷雾电压5400 V，去溶剂温度450℃，离子去簇电压10 V，环形聚焦电压60 V，入口电压5 V，碰撞室出口电压12 V。DLX和FX的检测离子对m/z分别为298.3→154.1和310.3→148.2，碰撞诱导电压分别为8.8 V和13 V。 1.2.2. 样品测定 取待测血浆样品200 μL，加入流动相100 μL、内标（IS）工作液（含氟西汀200 μg·L-1）100 μL、0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液100 μL后，混匀用3.5 mL正己烷/异丙醇（97/3）涡旋萃取8 min，离心8 m