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霜剂中EGF生物活性检测方法建立 董国秀，朱冬发，张辉 （上海普洛康裕药物研究院有限公司，上海，201314） 摘要：通过研究不同浓度的无机盐对从霜剂中抽提EGF时破乳的影响和抽提次数与抽提率的关系，建立一种在霜剂中检测表皮生长因子(EGF)生物活性的方法。EGF生物活性测定表明，用5% NaCl破乳后抽提EGF 3 次，霜剂中EGF的抽提效率可以达到93%。根据建立的方法，在排除霜剂中某些成分对生物活性测定的影响后，测定了在5℃、室温、40℃以及-5℃~40℃循环等温度条件下霜剂保存30天后EGF的生物活性。结果表明，该方法检测霜剂中EGF生物活性可行，可为规范化妆品生产及质量控制提供实验依据。 关键词：表皮生长因子；霜剂；抽提；MTT法 Bioactivity detection of epidermal growth factor in the cream DONG Guo-xiu , ZHU Dong-fa , ZHANG Hui (Shanghai Apeloa Pharmaceutical Research Institute, Shanghai, 201314) Abstract: A method was established to detect bioactivity of epidermal growth factor (EGF) in cream, after investigating the effect of concentration of inorganic salts on demulsification of cream and the effect of times on efficiency for extracting EGF. EGF bioactivity assay indicated that the extraction efficiency from cream could reach to 93% after demulsification for 3 times with 5% NaCl. Based on the established method, the bioactivity of EGF in the cream stocked for 30 days under 5℃, room temperature, 40℃, and -5℃ and 40℃ cycle were compared after eliminating the effect of some components in cream on measurement of EGF bioactivity. The measurement results showed that the method was applicable to detect bioactivity of EGF in cream, and suggested that the method could provide a basis for quality control of EGF in cosmetic industry. Keywords: epidermal growth factor; cream; extraction; MTT 人表皮生长因子（Human epidermal growth factor，简称EGF）又名尿抑胃素，广泛存在于人体组织中，人体液中如尿、乳液、血液、唾液、泪液、胃液、骨髓液等中都含有EGF，其中尿液、乳液中含量较多。Cohen和Gregorg于1975年都在尿液中分离得到人表皮生长因子，其一级结构也于同年得到了阐明。EGF成熟肽由53个氨基酸组成，分子量为6.2 KD， 等电点约为4.6-4.7，分子内有三对二硫键，以维持其蛋白构型和生物活性[ 1 ]。 EGF是一种重要的生长因子，也是最早发现并用于临床的生长因子之一。临床试用结果表明EGF 可促使外胚层细胞和毛细血管生长，促进烧伤、创伤及外科伤口的愈合，加速移植表皮和移植角膜的生长，因此对创伤性皮肤、角膜移植和外伤性皮肤溃疡等治疗有重要作用。 近年以来EGF由于能加速皮肤新生细胞替代衰老细胞的进程，使皮肤年轻化，还被广泛应用于化妆品[ 2 ]。它是生物工程技术及其制品在化妆品制造领域的渗透和应用[ 3 ]。EGF在化妆品中的作用[ 2-5 ]主要表现在护肤、修护，抗皱、防衰老，美白、祛斑，防晒及晒后修复、去除斑痕，护发、养发。目前市场上含EGF的化妆品也日益增多，主要有水剂、啫喱和膏霜等[ 6 ]。由于化妆品的制剂形态与生物制品存在较大不同，这对样品检测的灵敏度与准确性有较大影响，故检测样品的前处理极为关键[ 6 ]。陈科