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中国细胞生物学学报 Chinese Journal of Cell Biology 2011, 33(8): 847–854 http ://www.cj 研究论文 果蝇来源的GPCR Methuselah G蛋白偶联信号转导 通路研究 1,2 1 1,2 1,2* 张　静 　张　儒　叶晨立 　谢　欣 1 2 ( 上海市信号转导与疾病研究重点实验室, 同济大学生命科学与技术学院, 上海200092; 中国科学院上海药物研究 所国家新药筛选中心, 上海201203) 摘要 Methuselah(MTH)是果蝇来源的GPCR 中的一员, 它的突变可延长果蝇平均寿命并提 高果蝇对外界胁迫因素的耐受性。但目前对MTH在细胞水平的信号转导研究鲜有报道。该研究用 稳定表达MTH的HEK293细胞株, 对与该受体偶联的G蛋白选择性做了研究。首先, 用免疫荧光染 色、Western blot及钙流实验验证了MTH在HEK293/Myc-MTH细胞表面能稳定表达, 且具有正常生 物学活性; MTH受体被其配体N-stunted活化后所引起细胞内钙的上升不能被PTX预处理抑制, 提示 活化的MTH可能通过与Gq/ 11而非Gi/o蛋白相偶联; 进一步研究发现, MTH激活后不显著改变细胞 中的cAMP水平, 表明MTH不与Gs和Gi/o相偶联; MTH被激活后可引起ERK磷酸化。这些结果提示: MTH可能是Gq/ 11蛋白的偶联受体, 为进一步研究MTH的下游信号转导和生物学功能奠定了基础。 关键词 G蛋白偶联受体; Methuselah受体; G蛋白; 信号转导 G (G protein-coupled receptor, GPCR) Ja [12] 2007 , 蛋白偶联受体 性应激的耐受性。 等 于 年研究发现 当果 [1], MTH , 是目前已知的最大的细胞表面受体家族 是一类 蝇中持续性表达 受体的拮抗剂时 也会有效延 : , 长果蝇的平均寿命。这些研究提示 在果蝇中当受 高度保守的膜整合蛋白的超家族 它们可以将细胞 外的各种信号如光线、气味、激素、神经递质等 体MTH 的正常信号转导被阻断后就可能会导致果蝇 [2-4] G 平均寿命的相应延长和果蝇对外界胁迫因素耐受性 传递到细胞内 。在细胞水平上 蛋白偶联受体 G 的提高。另据报道, MTH受体在成年果蝇中还有参 都是通过与膜内侧的异源三聚体结合蛋白 蛋白的 偶联作用而将信号传递给下游的效应分子系统[5-6] 。 与调节雄性种系干细胞数量和感知运动的功能[13-14] 。 GPCR被激动剂激活后[7-8], G 相对于MTH受体在果蝇体内生理功能的研究 与其连接的 蛋白 亚基 α β γ , G , 和 、 亚基解离 活化的 蛋白亚基调节腺苷酸环