几种海洋微藻硝酸还原酶特性的初步研究.pdfVIP

维普资讯 第 27卷 第 6期 海 洋 水 产 研 究 V01．27，NO．6 2006年 12月 MARINEFISHERIESRESEARCH Dec．。2006 几种海洋微藻硝酸还原酶特性的初步研究 唐洪杰 王金花 。 祝陈坚h 杨茹君 石晓勇1,2,3 王修林 。 (t中国海洋大学海洋化学理论与工程技术教育部重点实验室 ，青岛 266003) (中国海洋大学化学化工学院，青岛266003) (中国海洋大学海洋污染生态化学实验室，青岛 266003) 摘要 确定了离体法提取时间，并采用离体法对5种海洋微藻硝酸还原酶的特性进行 了初步研究。 结果表明，离体法的最佳提取时间为 5min；在 pH7．9及 2O℃条件下，各藻硝酸还原酶的酶促反应 恒速时间及 以KNO。为底物的米氏常数存在差异，但以NADH为底物的米氏常数基本相同。酶促反 应恒速时间顺序为锥状斯氏藻尖刺拟菱形藻东海原甲藻中肋骨条藻旋链角毛藻，以KNO3 为底物的米氏常数大小顺序为旋链角毛藻东海原甲藻～中肋骨条藻锥状斯 氏藻～尖刺拟菱形 藻。此外，FAD对各藻硝酸还原酶活性的影响存在种属差异。 关键词 硝酸还原酶 硝酸还原酶活性 离体法 米氏常数 中图分类号 Q55；Q949．2 文献识别码 A 文章编号 1000—7075(2006)060048—07 Studiesoncharacteristicsofnitratereductaseinseveralmarinemicroalgae TANG Hong-jie’。 GJin-hua。。 ZHUChen-jian’’。 YANGRu-jun’。 SHIXiao—yong，，。 WANG Xiu一“n’’。 (KeyLaboratoryofMarineChemistryTheoryandTechnology，MinistryofEducation，OceanUniversityofChina，Qingdao266003) (CollegeofChemistryandChemicalEngineering，OceanUniversityofChina，Qingdao266003) (MarinePollutedEcochemistryLaboratory，OceanUniversityofChina。Qingdao266003) ABSTRACT Nitratereductase(NR)characteristicsoffivemarinemicroalgaewereinvesti- gatedbyusinginvitromethodwithdeterminedsamplehomogenizedtime．Theresultsshowed thattheoptimum homogenizedtimewas5min．OntheconditionofpH 7．9and20℃ ，thecon— stantvelocitytimeofNR catalyzed—reactionandtheMichaelisconstant(K )valuesfornitrate weredifferentamongvariousspecies，whereastheK valuesforNADH werebasicallyalike． TheconstantvelocitytimeofNR catalyzed—reactionfordifferentspecieswasinthesequenceof Scrippsiellatrochoidea Pseudo-nitzsch