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实验八：薄层色谱分离法 实验目的： 了解色谱分离的原理及其应用 初步掌握薄层色谱的操作技能 利用薄层色谱技术分离混合染料 基本原理-色谱 色谱法（Chromatography）亦称色层法、层析法等。 色谱法是分离、纯化和鉴定有机化合物的重要方法之一。色 谱法的基本原理是利用混合物各组分在某一物质中的吸附或 溶解性能（分配）的不同，或其亲和性的差异，使混合物的 溶液流经该种物质进行反复的吸附或分配作用，从而使各组 分分离。 色谱法在有机化学中的应用 分离混合物：一些结构类似、理化性质也相似的化合 物组成的混合物，一般应用化学方法分离很困难，但应 用色谱法分离，有时可得到满意的结果。 精制提纯化合物 有机化合物中含有少量结构类似的杂 质，不易除去，可利用色谱法分离以除去杂质，得到纯 品。 色谱法在有机化学中的应用 鉴定化合物：在条件完全一致的情况，纯粹的化合物在薄 层色谱或纸色谱中都呈现一定的移动距离，称比移值（Rf 值），所以利用色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性 质相似的化合物是否为同一物质。但影响比移值的因素很 多，如薄层的厚度，吸附剂颗粒的大小，酸碱性，活性等 级，外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。所以，要获 得重现的比移值就比较困难。为此，在测定某一试样时，最 好用已知样品进行对照。 跟踪一些化学反应进程：可以利用薄层色谱或纸色谱观察 原料色点的逐步消失，以证明反应完成与否。 固定相与流动相 固定相：用于与样品发生吸附作用的固定不动的物质。在 混合物样品流经固定相的过程中，由于各组分与固定相吸 附力的不同，就产生了速度的差异，从而将混合物中的各 组分分开。 流动相：也称洗脱剂，在色谱过程中起到将吸附在固定相 上的样品洗脱的作用。 样品和流动相的极性 样品的极性：样品与固定相的吸附能力与样品的极性密切 相关。一般来讲，极性越大的化合物与固定相的吸附能力 越强，越不容易被洗脱；反之则越弱，越容易被洗脱。 流动相的极性：流动相极性越大，越容易将吸附在固定相 上的样品洗脱；反之则越难洗脱。 结论：若样品极性越小，或流动相极性越大，样品在固定 相上的移动速度则越快。 常用洗脱剂的极性顺序 乙酸吡啶水醇类（甲醇 乙醇正丙醇） 丙酮 乙酸乙酯 乙醚氯仿二氯甲烷 甲 苯环己烷正己烷石油醚 越靠后洗脱能力越低。 关于薄层色谱 薄层色谱又叫薄板层析，是色谱法中的一种，是快速分离 和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液 吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。 适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离； 在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来精制样 品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而 不能用气相色谱分析的物质。 薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一 种“预试”。 实验步骤-薄层色谱 1. 制薄层板 2. 点样 3. 展开 4. 显色 制薄层板 固定相：Al O （软板）；AlO ＋羧甲基纤维素钠（硬 2 3 2 3 板，制一片） 软板制备：将固体Al O 在玻璃板上直接推成一薄层即 2 3 可。铺后要轻拿轻放，不能抖动、倾斜，防止粉末掉落 致使不均匀。 硬板制备：50 mL烧杯中放置7 g Al O ，逐渐加入5%羧甲 2 3 基纤维素钠（CMC）水溶液7 mL，调成均匀的糊状。将其 涂于一片玻璃板上，室温放置半小时后，放入烘箱中