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温度和缓冲溶液对胶束电动毛细管 色谱的迁移时间窗口的影响* 刘 震 邹汉法 叶明亮 倪坚毅 张玉奎 （中国科学院大连化学物理研究所色谱开放实验室 国家色谱研究分析中心 大连 116011） 提 要 以电渗淌度、胶束电泳淌度和淌度比这3个参数为考察对象，研究了毛细管温度、缓冲溶液种类和浓 度对胶束电动毛细管色谱的迁移时间窗口的影响。电渗淌度和胶束电泳淌度均随毛细管温度的升高线性的增 加，粘度是这一影响中的主要因素。理论上证明了管壁表面的局部粘度与主体粘度不同。当温度变化时，电渗淌 度和胶束电泳淌度的变化幅度不同。降低温度可以扩展迁移时间窗口，虽然扩展幅度较小，但在商品化仪器上 易于实现。推导出能统一描述电渗淌度和胶束电泳淌度与缓冲溶液浓度间的关系式。对于Tris和硼酸盐缓冲溶 液，电渗淌度和胶束电泳淌度均随缓冲溶液浓度的增加而降低，但变化幅度较小，因而对迁移时间窗口的影响 不显著。对于磷酸盐缓冲溶液，电渗淌度和胶束电泳淌度与缓冲溶液浓度的关系在不同浓度范围具有不同的趋 势，电渗淌度在低浓度时随浓度的增大而降低的速度显著，在高浓度时降低的速度缓慢；胶束电泳淌度在低浓 度时随浓度的增加而降低，在高浓度时随浓度的增加而增加；增加磷酸盐缓冲溶液的浓度，可以使迁移时间窗 口得到有效的扩展。 关键词 胶束电动毛细管色谱，温度，缓冲溶液，电渗淌度，胶束电泳淌度，迁移时间窗口 分类号 O658 河（北永年光导纤维厂）。电压25kV，检测波长214 1 前言 nm，气动进样2s×3.45kPa。考察温度的影响时温 迁移时间窗口是胶束电动毛细管色谱 M（ECC） 度设置为10,15,20,25,30,35,40 ；考察缓冲溶液 的重要特征，它决定了分离时间的长短和峰容量的 浓度的影响时温度设置为25℃。温控精度0.1℃。 大小，合适的迁移时间窗口是获得良好分离的关键。 2.2 试剂与样品 毛细管温度和缓冲溶液对迁移时间窗口均有影响。 以甲酰胺标记t0，以苯同系物 包（括苯、甲苯、乙 Skocir等[1]在分离氨基酸时发现，采用低温 （10 ） 苯、丙苯、丁苯）根据同系物迭代法[求算tm。考察 可获得最佳的分离，但目前只有Pyell等[2]对温度在 温度的影响时的运行缓冲溶液为：50mmol/LSDS MECC中的影响进行 了系统的考察；Muijselaar 20mmol/L三羟 甲基氨基 甲烷 T（ris）水溶液 p（H 等[3]考察了缓冲溶液离子强度对电渗淌度和十二烷 9.00）和50mmol/LSDS20mmol/L硼酸盐水溶液 基硫酸钠 S（DS）胶束电泳淌度的影响，但他们只使 p（H9.00）。考察缓冲溶液浓度的影响时，运行缓冲 用了1种缓冲溶液下的2个浓度点。因此，系统地研 溶液中SDS的浓度均为50mmol/L，缓冲溶液浓度 究温度和缓冲溶液的种类和浓度对电渗淌度、胶束 系列：Tris(pH9.00)、硼酸盐 p（H9.00）和磷酸盐 电泳淌度和迁移时间窗口的影响是必要的。 p（H9.00）为5,10,20,30,40,50mmol/L；磷酸盐 p（H7.20）为2.5,5,10,20,30,40,50mmol/L。μ蘣o和 2 实验部分 /μp,m数据均为 3次平行实验的平均值。 2.1 仪器 3 结果与讨论 电泳实验在BeckmanP/ACE5010自动化毛细 管电泳仪上进行，仪器控制和数据采集通过Beck- 对于给定的分离条件，t0决定于电渗淌度 （μo） manSystemGold工作站进行。毛细管为47cm 到（