玻璃化冷冻在辅助生殖技术中的应用.pdfVIP

第 7 卷第 2 期 实 用 临 床 医 药 杂 志 Vol. 7 No. 2 2003 年 4 月 Journal of Clinical Medicine in Practice Apr. 2003 综 　述 玻璃化冷冻在辅助生殖技术中的应用 孙海翔 , 胡娅莉 (南京大学医学院附属鼓楼医院 生殖医学中心 , 江苏 南京 , 210009) 　　关键词 : 玻璃化冷冻 ; 胚胎 ; 卵细胞 　　中图分类号 : R 32133 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : (2003) 　　随着体外受精 - 胚胎移植及其衍生技术的不 构的玻璃态 , 由于其质点不规则排列 ,能始终保持 断发展 ,胚胎冷冻技术已常规应用于人类辅助生 溶液的水分子和离子分布 ,使跨膜物质的浓度和 殖领域 。将剩余胚胎或因各种原因不在刺激周期 渗透压差别不大 ,从而避免了细胞内产生冰晶对 移植的胚胎进行冻存 ,最大限度地使用胚胎 ,减少 细胞的机械性损伤 ,也消除了细胞外冰晶形成引 了多胎妊娠 、OHSS 等不 良结果的发生 。配子和 起的理化损伤 。由于玻璃化冷冻能大幅度提高冷 胚胎的冷冻流程包括一系列繁琐技术 :将配子或 冻速率 ,使细胞迅速度过温度危险区 ,减少了对胚 胚胎置于保护剂中、冷冻至 0 ℃以下、保存 、需要 胎和卵细胞的透明带 、细胞骨架 、膜完整性等的损 时复温 、稀释和去除冷冻保护剂 、使其回复到生理 伤 。采用开放性冷冻方法 ,可使卵和胚胎暴露于 环境进一步发育 。如今 ,辅助生殖技术正朝着简 0 ℃左右的时间缩短至几毫秒 ,进一步提高了冷 单 、高效的方向发展 ,而玻璃化冷冻技术是一种无 冻速率 ,减少了冷冻损伤 。 需降温仪精密控制降温速度 ,室温下即可进行的 一般而言 ,冷冻液的浓度和组成 、胚胎在溶液 冷冻技术 。其操作简便 、冷冻损伤小 , 已成为研究 中的平衡过程 、冷冻和复苏速率 、复苏过程等是影 热点 。迄今为止 , 已有采用玻璃化冷冻方法对人 响玻璃化冷冻胚胎存活率的重要因素 。 的未成熟卵细胞 、成熟卵细胞 、卵裂期胚胎及囊胚 2 　玻璃化冷冻保护剂的选用 进行冷冻的成功报道 ,且有个例临床妊娠并足月 分娩[1～4 ] 。 玻璃化冷冻过程中,保护剂的选择非常重要 , 因其浓度可高达 8 mol/ L 。现临床所使用的各种 1 　玻璃化冷冻原理 保护剂不同程度地影响胚胎和卵细胞的结构和功 玻璃化冷冻技术操作简便 ,将配子或胚胎直 能 。何者更适合胚胎和卵细胞以及在保护剂中暴 接置于高浓度保护剂中 ,迅速投入液氮保存 。通 露的最佳时间长度 ,结果不一 。多数学者认为 , 乙 ( ) 过冷冻可以保存胚胎 ,但也不可避免会对它们造 二醇 EG 是能在室温和生理温度下平衡的低毒 成损伤 。冷冻保存技术的核心是尽可能减少冷冻 性冷冻保护剂 , 目前已较广泛应用于各种哺乳动 损伤 。冷冻损伤胚胎的主要因素有 2 个 :物理损 物胚胎和人胚胎的玻璃化冷冻 。研究表明 , EG ( )