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⑦为什么花瓣松动会给材料的消毒带来困难? 花瓣松动后,微生物就可能侵入到花药,给材料的消毒带来困难。 * 1、被子植物定义:凡是种子有果皮包被着,胚珠有子房壁包被着的植物,就叫做被子植物。 一、被子植物和裸子植物 2、裸子植物定义:凡是胚珠裸露,外面没有子房壁包被,种子外面没有果皮包被的植物称为裸子植物。 实例:玉米、大豆、梨、杏 实例:松、杉、柏 花的结构:花梗、花托、萼片、花瓣、雌蕊和雄蕊 3、花的结构 二、被子植物花粉粒的形成 花丝 花药:囊状结构,内有很多花粉粒 1、雄蕊的结构 雄蕊: 花粉是花粉母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。 2、被子植物花粉的发育 ②花粉粒的形成 花粉母细胞 (小孢子母细胞) 减数分裂 ①经历时期: 四分体时期、单核期、双核期 四分体时期 (进入单核期) 有丝 分裂 单核靠边期(小孢子) 单核居中期(小孢子) 小孢子 (单核花粉粒) 精子 精子 有丝 分裂 花粉管细胞核 生殖细胞核 生殖细胞 营养细胞 双核期 两个精子和一个营养核的基因型相同 1个花粉母细胞 4个小孢子 减数分裂 有丝分裂 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核 有丝分裂 8个精子 2n n n n n 四、产生花粉植株的两条途径 五、影响花药培养的因素 1、材料的选择 没有绝对的界限,主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。 不同植物的诱导成功率很不相同,就同一种植物来说亲本的生理状况对诱导成功率也有直接影响。 ②选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。 因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体,花粉发育的过程中,只有某一个时期对离体刺激敏感。 选材是否成功是花药培养成功的关键。 ①选材 一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养的成功率最高。即:最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期。 选择单核期以前的花药接种,质地幼嫩,极易破碎; 选择单核期之后的花药接种,花瓣已有些松动,又给材料的消毒带来困难,且难以挑选到单核期的花药。 ③花药培养时期的选择 ④其它时期选择的缺点 为了挑选到单核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾。盛开的或略微开放的花,都不宜选作实验材料。 ⑥选择完全未开放花蕾的原因 完全未开放的花蕾,可挑选到单核期的花药,菌少、易消毒 ⑤单核期花药的挑选 ⑦花药培养时间 一般月季的花药培养时间选在5月初到5月的中旬,即月季的初花期。初花期的花蕾营养状态及生理状态会比较好,可提高花粉的诱导成功率。 月季花药培养时的花粉粒最好是( ) A、四分体时期 B、单核居中期 C、单核靠边期 D、二核或三核花粉粒 C 2、培养基: 花药培养基所采用的培养基可能因植物的不同而有所变化小麦为N6培养基,马铃薯、月季为MS培养基,油菜为B5培养基。 3、其他因素 亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种的密度等对诱导成功都有一定的影响 六、实验操作 (一)材料的选取 ②某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青-铬矾法,这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 ①最常用的方法有醋酸洋红法 1、方法 ①醋酸洋红法染色机理 醋酸洋红为碱性染色剂,而花粉细胞内有染色体,染色体主要成分是DNA和蛋白质,易被碱性染料着色染成红色 。 将体积分数45%的醋酸100ml煮沸,缓缓加入1g洋红,再加热回流8h,冷却至50℃,过滤即可。 ②醋酸洋红的配置 2、醋酸洋红法 将花药放在载玻片上,加一滴质量分数1%的醋酸洋红,用镊柄将花药捣碎,盖上盖玻片在显微镜下检查。 ③染色操作 3、焙花青—铬钒法 将无水酒精与冰醋酸按体积比为3:1的比例混匀 ①卡诺氏固定液的配制方法 花药应该在卡诺氏固定液中固定20min,然后取出放在载玻片上,加焙花青—铬钒溶液染色,盖上盖玻片后在显微镜下检查。这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。 将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸馏水中,溶解后加入0.1g焙花青,混匀并加热至沸腾,煮沸5分钟后冷却至室温,过滤,加蒸馏水定容至100ml。 ②焙花青—铬钒溶液的配制方法 ③染色操作 *
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