乐昌含笑不同类型鉴定的issr2pcr 探究 3.pdfVIP

第 38 卷 第 6 期 林 业 科 学 Vol38 , No6 2 0 0 2 年 11 月 SCIENTIA SILVAE SINICAE Nov. , 2 0 0 2 乐昌含笑不同类型鉴定的 ISSRPCR 分析 邱英雄　傅承新 何云芳 　　　 (浙江大学生命科学学院　杭州 310029) (浙江省林业厅种苗管理站　杭州 310029) ( ) 摘 　要 : 　利用 inter - 简单重复序列 ISSR 标记对乐昌含笑 6 种类型的遗传变异进行了研究 , 从 30 个引物中 筛选出 12 个多态性引物用于正式扩增 ,共扩增出 134 条 DNA 带 ,其中多态性 DNA 带 67 条 , 占50 % ,平均每个 引物扩增的DNA 带的数目为 11167 条。其中引物 ISSR16 、ISSR19 能区分全部类型。引物 ISSR16 、ISSR19 和 ISSR2 在不同的类型中扩增出了一些特有条带 ,对乐昌含笑类型和品种鉴定以及检验品种的真实性方面非常 有价值。本研究对 ISSR 分析技术的关键步骤进行了讨论 ,并利用 DNA 扩增结果对供试类型进行了聚类分 析。 关键词 : 　乐昌含笑 , 类型鉴定 , ISSRPCR IDENTIFICATION OF MICHELIA TSOI TYPES USING ISSRPCR MARKER ASSAYS Qiu Yingxiong 　Fu Chengxin ( College of Life Sciences , Zhejiang University 　Hangzhou310029) He Yunfang ( Management Station of Seed and Seedling , Zhejiang Forestry Bureau 　Hangzhou310029) Abstract : 　Based on introduction and selective breeding of Michelia tsoi , genetic variations of 6 M . tsoi types were de termined using ISSR marker assays. 12 primers were screened from 30 primers , and total 134 DNA bands were amplified , 67 of which (50 %) were polymorphic. The average number of DNA bands amplified by each primer was 11. 167. DNA profiles based on ISSR16 , ISSR19 and ISSR2 have revealed potential diagnostic fingerprints and specific bands for various types. The ISSR specific bands are useful for the identification of cultivated germplasm , and testing trueness of cultivars. Key steps of ISSRPCR analysis techniques