瘢痕成纤维细胞培育及其生物学行为的实验研究.pdfVIP

( ) · 233· ChineseJReparativeandReconstructiveSurgery,1998,Vol12 6 瘢痕成纤维细胞培养及其生物学行为的 实验研究 # 黄 　勇 　任林森 　岑 　瑛 　　摘 　要 　　为探讨不同瘢痕在体外培养情况下 ,其成纤维细胞生物学特性 ,切取正常皮肤 、增 生性瘢痕和瘢痕疙瘩分别行体外成纤维细胞原代和传代培养 ,观察成纤维细胞形态学和生长动力 学变化 。结果发现 ,三类细胞的形态学方面没有明显差异 ,但瘢痕疙瘩成纤维细胞排列更加紊乱 , 极性消失 ,有交叉重叠现象 。在接种相同的细胞密度和相同的培养条件下 ,其细胞生长率 、分裂指 数 、克隆形成及 DNA含量无明显差别 。认为 ,三类细胞在体外培养状态下 ,其形态学和生长动力学 无显著差异 ,且具有相似的生物学特性 。 关键词 　　增生性瘢痕 　　瘢痕疙瘩 　　细胞培养 　　增生性瘢痕和瘢痕疙瘩是皮肤伤口愈合 箱内培养 3 小时 30 分钟后加入含 20% 小牛血清 ( ) μ 过程中瘢痕组织过度增生性病变 。临床医师 FCS ,青霉素 100U ml, 链霉素 100 gml 的 DMEM ( 根据其不同的生物学特征较易将两者区分 。 培养液 dulbeccominimumessentialmedium,DMEM, 日 ) 但在体外培养情况下 ,其成纤维细胞生长特 本 日水制药 5ml 继续培养 ,每周换液二次 。待原代 培养细胞生长基本融合成片时 ,吸除培养液 ,Hank’s 性如何 ,生物学行为有何异同 , 目前在这方面 液漂洗二次后加入 0.5% 的胰蛋白酶消化约 1 分钟 , 的研究较少 。我们的实验拟通过对正常皮 镜下见胞质回缩 、细胞间隙增大时 ,加入 DMEM培养 肤 、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞体外 液终止消化 ,吸管轻轻吹打瓶壁细胞使呈细胞悬液 , 培养 , 比较研究其形态学和生长动力学 , 以探 按 1 ∶3 比例分装传代 。我们的实验均在第 4 代～第 讨不同组织成纤维细胞体外培养状态下的生 6 代进行 。 物学特征 。 1.3 　成纤维细胞计数及生长曲线 取第 4 代生长状态 良好的三类成纤维细胞 ,经 5 1 　材料与方法 漂洗消化制成细胞悬液后 ,每培养瓶加入 2 ×10 个 1.1 　实验对象 细胞 ,共 10 组 ,每组 3 瓶 ,37 ℃恒温温箱内培养 。从 组织标本取自于 11 例患者 ,正常皮肤和增生性