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摇 南京农业大学学报摇 2011,34(1):107-112
摇 Journal of NanjingAgricultural University http:/ /
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方剑玉,郑其升,郭小参,等.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 M 蛋白CD T 细胞表位优势区的鉴定[J].南京农业大学学报,2011,
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34(1):107-112
高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒M 蛋白
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CD T细胞表位优势区的鉴定
4
1,2 1 3 2 1,2 1 1* 2
方剑玉 ,郑其升 ,郭小参 ,侯凤香 ,王琳 ,陶红梅 ,侯继波 ,陈溥言
(1.国家兽用生物制品研究中心,江苏 南京210014;2.南京农业大学动物医学院,江苏 南京210095;
3.河南农业大学牧医工程学院,河南 郑州450002)
摘要:采用RT鄄PCR方法扩增猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)临床分离株的M基因(525 bp),通过设计4 对引物,
把M蛋白分成4段K1(78-112)、K2(98-131)、K3(118-153)、K4(139-174),分别扩增相应基因M1、K1、K2、K3 和K4,连接
pET-32a(+)表达载体,经鉴定后转化Escherichia coli BL21,经IPTG诱导表达,SDS鄄PAGE和Western鄄blot检测结果显示,分
3 3
别在相对分子质量30.8伊10 和24.4伊10 位置出现目的条带,重组蛋白均可与阳性血清发生特异反应。 将蛋白M1免疫
BALB/ c小鼠,于第三次免2周后从小鼠脾脏分离淋巴细胞,分别用K1、K2、K3、K4蛋白进行体外刺激。 流式细胞仪检测分
泌IFN鄄酌细胞因子的T细胞的频率,K1蛋白刺激组显著高于其他组和对照组(P臆0.01)。结论:M1蛋白K1(78-112)段为
T细胞表位优势区。
关键词:高致病猪繁殖与呼吸综合征病毒;M蛋白;T细胞表位;表位优势区
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中图分类号:S852.4 3摇 摇 摇 摇 文献标志码:A摇 摇 摇 摇 文章编号:1000-2030(2011)01-0107-06
Identification of CD+ T cell epitope dominance region in M protein of
4
porcine reproductive and respiratory syndrome virus
1,2 1 3 2 1,2
FANGJian鄄yu ,ZHENG Qi鄄sheng ,GUO Xiao鄄can ,HOU Feng鄄xiang ,WANG Lin ,
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