蛋白A定向固定抗体的纤维蛋白压电免疫传感器的研究.pdfVIP

V o l. 19 高 等 学 校 化 学 学 报 N o. 3　 1 9 9 8 年 3 月 　　 　　　 CH EM ICAL JOU RN AL O F CH IN E SE U N IV ER S IT IE S　　　　　 363～ 367　 蛋白A 定向固定抗体的纤维蛋白压电免疫传感器的研究 裴仁军　胡继明　胡　毅　 曾云鹗 (武汉大学分析测试科学系, 化学系, 武汉, 430072) 摘要　将 9 M H z 双面镀金石英晶体浸入蛋白A 溶液中, 在晶体电极表面形成一层均匀的蛋白A 薄层, 用于定向固定人体纤维蛋白抗体. 在蛋白A 层上形成一层有序致密的自组装抗体分子膜, 研制成一种新型的用于人体纤维蛋白检测的压电免疫传感器. 比较了 3 种固定抗体方法的效果, 从传感器的灵敏度、稳定性、重现性等考虑, 蛋白A 吸附法优于聚乙烯亚胺及牛血清白蛋白固定 抗体的方法. 研究了蛋白A 浓度、抗体效价以及抗原抗体反应时间等对传感器灵敏度的影响, 考 - 4 - 2 察了电极的选择性和再生能力. 纤维蛋白在 1 ×10 ～ 1 ×10 浓度范围内有良好响应. g L 关键词　蛋白 , 抗体的定向固定, 压电免疫传感器, 纤维蛋白 A 分类号　 657 O 人体血液中的纤维蛋白(F n ) 是机体内凝血系统和抗凝系统的重要物质, 其含量是多器官 衰竭、重症肝炎、肝硬化和肝癌转移等病症的临床检测指标. 目前, 用于F n 检测的免疫学方 法有免疫扩散和火箭免疫电泳等方法, 前者灵敏度不高, 检测费时; 后者操作较复杂[ 1, 2 ]. 因 此, 寻找一种简单、快速、灵敏且可精确定量的检测方法在临床医学上有很重要的价值. 压电免疫传感器是一种新型的免疫传感器件, 具有仪器装置简单、灵敏度高、能快速检 测、无需标记、可精确定量等优点, 近 20 年来得到迅速发展, 已被广泛用于环境监测、食品 [3 ] [4 ] 工业、生物技术、化学分析和临床诊断等领域 . 蛋白A 既能在金颗粒上强烈吸附 , 又能 [ 5 ] [ 6～ 9 ] 和人及多种哺乳动物血清中 IgG 的F c 段结合 , 因此常用于金电极上抗体的定向固定 . 本文以蛋白A 作载体吸附于金电极表面, 用于 F n 抗体的定向自组装, 研制了一种新型 的F n 免疫传感器. 1　实验部分 1. 1　仪器与试剂 石英压电晶体: 9 M H z, A T 切型, 双面镀金, 晶片直径 12. 5 mm , 电极直径 6 mm (北京 ) (