槐耳清膏诱导人直肠癌HR8348细胞凋亡的实验研究.pdfVIP

5·68 · 中国普外基础与临床杂志2003 年 11 月第 10 卷第 6 期　Chin J Bases Clin General Surg , Vol. 10 , No. 6 , Nov. 2003 基础与实验研究 【文章编号】1007 - 9424( 2003) 06 - 0568 - 04 槐耳清膏诱导人直肠癌 HR8348 细胞凋亡的实验研究 1 1 2 3 程若川 　汤礼贵 　兰丽琴 　贾 　伟 【摘要】　目的 　探讨槐耳清膏在体外对人直肠癌 HR8348 细胞的生长抑制作用和凋亡诱导作用及其作用机理。方 ( ) ( ) 法 　将处于对数生长期的 HR8348 细胞用含槐耳清膏的培养基培养 36 h ,用四氮唑蓝 M TT 比色法检测吸光度 OD 值 ,计算抑制率 ; 用甲基绿派若宁染色法及 TUN EL 法检测细胞凋亡指数 ; 用免疫组织化学方法检测 bcl2 、bclxl 、bax 、 bak 及 p53 基因表达的情况。结果 　槐耳清膏对 HR8348 细胞的抑制率随浓度增加而上升 ,浓度为 4. 0 mg/ ml 时抑制率 ( ) ( μ ) ( ) 最大 71. 1 % ,与 5FU 组 浓度为 10 g/ ml 相比差异无显著性意义 P 0. 05 。甲基绿派若宁染色法和 TUN EL 法均 可见到典型的细胞凋亡、凋亡小体或出泡现象 ,凋亡指数随槐耳清膏浓度的增加而增加 ,当浓度达 4. 0 mg/ ml 时 ,凋亡指 数迅速上升 , 甲基绿派若宁法为 0. 162 0 ±0. 012 8 , TUN EL 法为 0. 261 2 ±0. 015 8 , 均大于 5FU 组的凋亡指数 (0. 078 0 ±0. 009 5 和 0. 102 8 ±0. 013 1) , P 0. 05 。槐耳清膏组bcl2 、bclxl 、bak 、p53 蛋白表达较空白对照组明显增强 ( ) ( ) P 0. 05 ,而 bax 变化不明显 P 0. 05 。槐耳清膏组 bak/ bcl2 和 bak/ bclxl 比值显著大于空白对照组。结论 　槐耳 清膏在体外对人直肠癌 HR8348 细胞具有显著的抑制作用和凋亡诱导作用。槐耳清膏诱导人直肠癌 HR8348 细胞凋亡 可能与提高 bak/ bcl2 、bak/ bclxl 比值及上调p53 基因表达有关。 【关键词】　　细胞凋亡 　　bcl2 家族 　　p53 基因 　　槐耳多糖 　　HR8348 细胞 【中图分类号】R735. 37 ∶R285. 5 　　　【文献标识码】A Study on Apoptosis of Human Rectal Adenocarcinoma Cell Line HR8348 Induced by Polysaccharide of Trametes Robiniophila