iTRAQ技术在植物中的应用.docVIP

  iTRAQ 技术在植物中的应用# 薄乐涛，陈书燕，廖蕊，解美勤** （兰州大学生命科学学院，兰州 730000） 5 10 摘要：近些年来，随着生物科学技术的不断进步，蛋白质组学研究已经成为生命科学研究的 热点，其相关研究技术也如雨后春笋一般涌现，同位素相对标记和绝对定量 (iTRAQ)技术 自从 2004 年被美国应用生物系统公司开发以来，依仗着自身独特的高敏感性和高准确性的 串联质谱及多维液相色谱联用，已经逐渐成为蛋白质组学定量分析的主流技术。iTRAQ 技 术可对复杂样本、细胞器、细胞裂解液等样本进行相对和绝对定量研究，具有较好的定量效 果及较高的重复性。由于其能够同时对最多 8 种样品进行标记分析，使得其在生命科学的各 个领域都取得了广泛的应用。在植物的蛋白组学研究中也取得了很大进展。本文对 iTRAQ 技术的原理、优缺点、实验流程以及在植物中的应用进展进行了综述。 关键词：植物学；同位素相对标记与绝对定量(iTRAQ)技术；蛋白质组学 中图分类号：Q-31 15 Application of iTRAQ technology in plants BO Letao, CHEN Shuyan, LIAO Rui, XIE Meiqin (School of Life Sciences, Lanzhou University, LanZhou 730000) Abstract: In recent years, with the radiply development of biological science and technology, 20 25 30 35 40 proteomic research has become a hotspot in life science research, and its corresponding methodological research has sprung up like mushrooms, in 2004, A new technique was developed by Applied Biosystems : relative and absolute quantification(iTRAQ) technology, it has high sensitivity and accuracy, particularly the new combination of multi-dimensional liquid chromatography and mass spectrometry (MS) based technologies with protein fragmentation methods, it has gradually become the mainstream of quantitative analysis of proteomics technology. The iTRAQ technology has a good quantitative effect and a high repeatability result in complex samples, organelles, and whole cell lysates. It can simultaneously analysis up to eight samples, hence iTRAQ has been widely used in areas of life science. It also has made great progress in the study of plant proteomics. This paper is focused on the principle, experimental procedure and application in plants of iTRAQ. Keywords: Botany; Isobaric tags for relative and absolute quantitation; Proteomics 0 引言 近些年来，随着人类基因图谱的完成，科学家将生命科学研究的重心已经放到了生物功 能的整体研究上面。但是因为基因组学自身所存在的局限性，是无法回答蛋白质的表达水平、 表达时间、翻译后的修饰以及蛋白质与蛋白质或蛋白质与其它生物分子的相互作用等问题。 自 1994 年 Wilkins 等人第一次提出蛋白质组学的概念以来[1]，蛋白质组学已在生命科学 及医学的各个研究领域繁荣发展。在过去的研究中，很多科学家都把研究对象集中于蛋白质 组的大规模定性分析，而如今蛋白质组学研究的一个主要目