蛋白质药品冷冻干燥过程中变性原理的研究进展.pdfVIP

中国生化药物杂志 Chinese Journal of Biochemical Pharmaceutics 2000 年第 21 卷第 5 期 263 蛋白质药品冷冻干燥过程中变性机理的研究进展 刘占杰 　华泽钊 　　摘 　要 :阐述了在药品冷冻干燥的过程中 ,蛋白质变性机理的研究现状 ,指出其中存在的问题 ,提出了研究思 路和方法 , 以求优化冷冻干燥过程,提高冻干蛋白质的质量。 　　关键词 　冷冻干燥 , 蛋白质 , 保护剂 　　中图分类号 　R977. 6 A Review on the Denaturation Mechanism of Protein Pharmaceuticals in Freezedrying Process Liu Zhanjie , Hua Zezhao Instit ute of Ref ri geration and Cryogenics , S hanghai U niversity of Science and Technology ( S hanghai 200093) 　　在制造蛋白质类药物时 ,蛋白质分子受到物理或化学因 要原因。从二十世纪八、九十年代至今 ,普遍认为在冷冻干 素的影响 ,性质常有所改变 ,这类变化统称为变性。蛋白质 燥过程中冷冻和干燥都会引起蛋白质变性。Dean[ 4 ] 认为在 在变性过程中 ,伴随有下列现象[ 1 ] : ①生物活性的丧失 ; ②一 冷冻过程中缺少保护剂的情况下 ,蛋白质将失去活性 ;而脱 些侧链基团的暴露 ; ③一些物理化学性质的改变 ; ④生物化 水过程本身能使蛋白质损伤 ,从而使复水后的蛋白质失去活 学性质的改变。 性。关于蛋白质在冻结过程中变性的机理 ,大多数研究者认 为防止蛋白质变性 , 目前广泛应用的是冷冻干燥技术 为蛋白质分子周围分布着多层水分子 ,在降温过程中 ,蛋白 (freezedrying) 。冷冻干燥技术是将含水物质在低温下冻结 , 质分子周围的水分子不断冻结 ,但只要蛋白质分子表面的单 然后在真空条件下通过对冻干物料加热使冰升华 ,再除去物 层水分子没有冻结 ,则蛋白质就不会变性 ,反之 ,蛋白质就会 料中部分吸附水 ,得到干制品。用这种方法制造的药品所希 变性。Hanafusa[ 5 ] 利用在冷冻干燥过程中比较稳定的卵清蛋 望的特征是 :结构稳定 ,生物活性基本不变 ,药物中的易挥发 ( ) ( ) 白 ovalbumin 和不稳定的肌球蛋白 myosin 进行冷冻干燥 性成分和受热易变性成分损失很少 ,呈多孔状 ,药效好。然 对比实验 ,发现随着温度的降低 ,肌球蛋白中的未冻水含量 而冷冻干燥过程存在着一些潜在的损伤危险。在预冷、一次 逐渐降低 ,而卵清蛋白中的未冻水含量在低于 0 ℃后开始下 干燥、二次干燥和储存过程中 ,药品中的蛋白质可能存在一 降 ,在 - 20 ℃～ - 45 ℃基本不变 ,温度低于 - 45 ℃后 ,随着温 定程度的变性 ,因此必须弄清楚冷冻干燥过程中蛋白质的变 度的降低 ,未冻水的含量又开始下降 ,从而认为在卵清蛋白 性机理 , 以便制定可靠的冷冻干燥程序,采用优化的冷冻干 温度从 0 ℃降到 - 20 ℃的过程中 ,蛋白质分子周围的多层水 燥过程 ,生产出高质量的药品。 分子冻结 ;温度从 - 20 ℃降到 - 45 ℃的过程中未冻水含量保