果蝇心脏发育标记基因lbe的多克隆抗体制备.pdfVIP

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2017-09-14 发布于湖北
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果蝇心脏发育标记基因lbe的多克隆抗体制备.pdf

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第2l卷第2期激光生物学报 V01．21No。2 2012年4月 ACTALASERB10LOGYSINICA Apr．2012 toi：10．3969／j．issn．1007-7146．2012．02．013 果蝇心脏发育标记基因lbe的多克隆抗体制备徐腊梅，朱玲，刘腾，吴秀山，邓云+，袁婺洲’ (湖南师范大学生命科学学院，湖南长沙410081) 摘要：lbe是已经证明的心脏标记基因。为了深入研究f6e在心脏发育中的功能，需要获得lbe蛋白并制备其抗体。首先提取野生型成体果蝇的总RNA，反转录获得其eDNA文库，通过PCR克隆出胁编码区序列，将其连兔制备lbe多克隆抗体，并用Westernblotting检测抗体的效价和特异性。结果显示获得了lbe原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗lbe多克隆抗体，为№功能的进一步研究奠定了基础。关键词：lbe；果蝇；融合蛋白；多克隆抗体中图分类号：Q78；Q503 文献标识码：A 文章编号：1007-7146(2012)02-0162-05 of ofHeart Marker PreparationPolyclonalAntibody Development in ， Gene／be Drosophila 4 XU Wuzhou Lamei，ZHU Yun+，YUAN Ling，LIU死愕，删Xiushan，DENG ofLife Normal 41008 (CollegeScience，HunanUniversity，Changsha1，Hunan，China) a to is tobe cardiacmarker ofthelbe andit’s isthefirst Abstract：lbe antibody proven gene．Obtianingprotein step the oflbe after thetotalRNAfrom detectfunctioninheart PCR isolated adult development．First．reversetranscriptional wild anduseitasthe of ofzebrafishIbewas withRT- Drosophilatype template，Thepartencodingsequence amplified insertedinto vectorinframe．Therecombinantwasidentifiedwith andse— PCR，and pET-28a pla