牛myf6 基因真核表达载体的建构及在成肌细胞中的表达.pdfVIP

中国农业科学 2010, 43(13):2784-2790 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2010.13.019 牛myf6基因真核表达载体的构建及在成肌细胞中的表达 汤展毅，严云勤，高学军，陆黎敏，朱丹丹，冀志庚 （东北农业大学生命科学与生物技术研究中心, 哈尔滨 150030 ） 摘要：【目的】构建牛 myf6 基因真核表达载体，并观察myf6 真核表达载体转染鲁西黄牛成肌细胞后基因的 表达和细胞形态的变化。【方法】在质粒 pIRES2-EGFP 的多克隆位点插入 myf6 基因构建真核表达载体 pIRES2-EGFP-myf6 ，用脂质体技术转染鲁西黄牛成肌细胞，通过 G418 筛选出稳定转染的细胞株。利用 Western 印记、Real-time PCR技术检测成肌细胞转染前后myf6基因、肌肉肌酸激酶基因和肌球蛋白轻链基因的表达量。 【结果】与对照组相比，转染质粒的