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湖南化工职业技术学院
毕业论文
柠檬酸发酵生产菌种黑曲霉的复合诱变选育
学生姓名: 吴鹏
学 号:201103021128
专业班级: 生化1111
指导老师: 罗跃中
2013 年 12月 2日
目 录
1 .引言 1
1.1黑曲霉 1
1.2黑曲霉诱变方法 1
1.2.1紫外照射诱变 1
1.2.2微波诱变 2
1.2.3烷化剂(DES) 诱变 2
1.2.4碱基类似物 2
1.3.5新型的诱变方法 3
1.3柠檬酸 3
1.3.1柠檬酸用途 4
1.3.2柠檬酸循环(citric acid cycle) 4
1.4实验发酵机理 4
1.5发酵方法 4
1.6黑曲霉菌柠檬酸发酵的影响因素 5
1.7本课题的研究意义 6
2.主要研究内容 8
2.1材料与方法 8
2.1.1菌株 8
2.1.2?主要仪器和设备 8
表1 主要仪器与设备 8
2.1.3主要化学试剂 9
2.1.4?培养基 9
2.2.?试验方法 9
2.2.1悬浮液制备 9
2.2.2 相关试剂的制备 10
2.3紫外线诱变处理 10
2.3.1硫酸二乙酯(DES)诱变处理 11
2.3.2亚硝酸诱变处理 11
2.4遗传稳定性试验 11
3结果与分析 12
3.1氢氧化钠浓度标定的结果 12
3.2 紫外线诱变筛选结果? 12
3.3硫酸二乙酯(DES)诱变筛选结果 14
3.4 亚硝酸诱变筛选结果 15
4结论 16
参考文献 17
致谢 18
柠檬酸发酵生产菌种黑曲霉的复合诱变选育
学 生:指导老师:罗跃中
湖南化工职业技术学院摘 要
柠檬酸(citric acid)是动植物体内的一种天然成分和生理代谢的中间产物,是微生物发酵法生产的重要有机酸,用途极为广泛而有良好的发展前景。本研究从应用角度出发,在现有工作基础上,进一步开展柠檬酸发酵菌黑曲霉(Aspergillus niger)的选育研究,主要有紫外线照射、硫酸二乙酯以及亚硝酸等方法对柠檬酸发酵菌黑曲霉进行诱变。通过三种不同的方法进行诱变,并经过初筛、传代、选择性培养、筛选之后,共获得10株产酸相对较高的优良菌株,基本达到了试验的预期目标。在实验的最后我们根据实验的结果对于诱变的机理进行了分析和讨论。
主要结果如下:
(1)通过菌株试验得到了产酸高的YZ-UV-5”菌株。(2)出发菌黑曲霉“YZ-35”在产柠檬酸的诱变过程中含量均有所提高。经过紫外线照射后的黑曲霉菌株产酸含量最高,,经过亚硝酸诱变后的黑曲霉菌株产酸含量,经过硫酸二乙酯诱变后的黑曲霉菌株产酸量。
Citric acid fermentation strains of Aspergillus niger complex BreedingStudent: Wu PengInstructor: Luo Yue zhongHunan College of Chemical Technology
Abstract
Citric acid (citric acid) is a natural component of the physiological and metabolic intermediates of plants and animals , is an important organic acids produced by microbial fermentation , extremely versatile and has good prospects for development. In this study, from the application point of view, on the basis of existing work , further development of citric acid fermentation Aspergillus niger (Aspergillus niger) breeding research , mainly ultraviolet radiation, diethyl sulfate and nitrite methods such as citric acid fermentation bacteria Aspergillus niger mutagenesis . Through three different methods mutagenesis , and after screening , passage , selective culture , after screening, 10 were obtained relatively high acid production str
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