qg~-5种免疫增强剂对猪PBMC增殖反应的影响S乒f2一.pdfVIP

维普资讯 第20卷 第5觑 固 兽 Voj． + NO．5 2000年 9 月 hmrnal of ；． 200O q_g~- 5种免疫增强剂对猪PBMC增殖反应的影响 S乒f2一 谢明权 ，宋长 黄 忠．张春红 ，杨傲冰，杜伟 贤 (广东省农业科学院兽医研究所，广东广州 51。64D) 一 — — 一 — — — — 凸摘要：采用胸腺素、黄蓖多糖、人胎盘组织液、人重组白细胞赍素 2(rIt2)及左旋眯唑， 同浓度刺激体外 培养不同时间的猪外周血单个桉细胞 (PBMC)，结果证明这几种佐剂均对猪PBMC有明显刺激作用，且与旅 度有依赖关系．浓度过高时对其有抑村作用，适宜的浓度为 104倍稀释度。时间因素的影响较小．但培葬36h 扭人各种佐剂后PEMC增殖反应未见增强 。PEMC代表机体 ．息的细胞免疫水平 ．通过佐剂对体外培养的 PBMC增殖反应水平影响的测定．为动物用免疫佐剂和免癌增强剂的筛选提供 ，一种朽效方法。 关键词：堕 璺±蔓塑堕：堕星查；鱼壅 堡 中图分类号 ：$852．4 文献标识码：A 文章编号2000)05—048502 能够增强动物体免疫能力的免疫增强剂 (佐 L；盐酸左旋眯唑，广州市桥制药 厂 出品，批号 剂)有许多种，包括生物活性成分、细胞因子、化学 980406，含量 5g／L；人重组 白细胞介素 2(rIL一 药物及 中草药类等。测定免疫增强作用的指标有 2)，北京四环生物制品厂出品，批号980212，含量 多种 ，如猪外周血单个核细胞 (PBMC)增殖反应 、 5000IU／mL；人胎盘组织液，湖南湘潭制药二厂 白细胞介素 2(IL一2)分泌水平 、CTI活力、NK细 出品，批号 980518，有效成分含量 20 。 胞活性、特异性抗体产生水平等 但体内测试其各 13 猪PBMC 无菌采肝素抗凝血，加入等体 种指标受到许多因素如实验动物、环境等的影响， 积的无Ca”、Mg 的Hanks液混匀，小心重叠于 因而结果变异较大 IJ‘。由于PBMC增殖反应是机 等体积的淋 巴细胞分离液[密度 1．077(0．002)] 体总体免疫水平的反映，抗体的产生 、细胞因子的 上 ，1500r／rain离心 30min，吸取中间的白色细 释放、细胞杀伤作用的变化等都是 此为基础的， 胞层 ，用无 Ca 、Mg。的Hanks液洗 2次，用完 故本试验采用体外培养的PBMC增殖反应来评 全RPMI1640培养液洗 1次．血细胞计数器计算 估免疫增强剂的作用 ，以期建立一种直观、简便 、 细胞数口．3l 易于量化、易于标准化 的评估药物免疫增强作用 1．4 PBMC增殖反应的测定 在 96孔细胞培 的方法 养板中，按试验设计分别加入不 同浓度 的PHAp 5O L．PBMc50 L，总体积 200 L，每一样品设 1 材料与方法 3个复孔，37C、5 C