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·110 · 中华危重病急救医学 2014 年 2 月第 26 卷第 2 期 Chin Crit Care Med ,February 2014 ,Vol.26 ,No.2
·论著·
血红素加氧酶 -1 对过氧化氢损伤的
Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡的影响
刘海霞 陈淼 杨秀娟 戢慧 陈涛 陈华军
【摘要】 目的 探讨血红素加氧酶 -1(HO-1 )对过氧化氢(H O )刺激后原代培养大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞
2 2
(AECⅡ )凋亡率、活化天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3 )及细胞色素C(Cyt-C )表达的影响。 方法
原代培养雄性 SD 大鼠 AECⅡ细胞,被随机分为 4 组:对照组(A 组)加入生理盐水;H2O2 损伤组(B 组)加入
0.5 mmol/L H O 处理; HO-1 预处理组(C 组)给予 0.2 滋mol/L HO-1 预处理 2 h 后加入 0.5 mmol/L H O ;
2 2 2 2
HO-1 抑制组(D 组)给予 10 滋mol/L 锌原卟啉 Ⅸ(ZnppⅨ )预处理2 h 后加入 0.5 mmol/L H O ,各组细胞处理后
2 2
继续培养。 于药物干预后 2 、6 、12 h 采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot )
检测活化 caspase-3、Cyt-C 蛋白表达。 结果 各组细胞凋亡率均随 H O 作用时间延长而逐渐升高;B 组干预后
2 2
各时间点 AECⅡ凋亡率均较 A 组显著增加; C 组 AECⅡ凋亡率则较 B 组明显降低〔2 h :(11.46±1.47)% 比
(20.83±1.55 )% ,6 h :(12.30±1.37)% 比 (27.14±1.53 )% ,12 h:(12.62±1.39)% 比 (35.66±0.74 )% , 均 P <
0.05 〕;D 组 2、6、12 h AECⅡ凋亡率〔(24.33±1.36 )% 、(31.67±1.24 )% 、(36.93±2.40 )% 〕与B 组比较则差异无
统计学意义。 各组活化 caspase-3、Cyt-C 蛋白表达量均随 H O 作用时间延长而逐渐增加;B 组各时间点活化
2 2
caspase-3 、Cyt-C 蛋白表达量均较 A 组明显增加; C 组活化 caspase-3 蛋白表达量(灰度值)较 B 组明显减少
(2 h : 0.250±0.039 比 0.650±0.072 , 6 h :0.470±0.080 比 0.960±0.118 ,12 h:0.680±0.099 比 1.830±0.220,均
P <0.05);Cyt-C 蛋白表达量(灰度值)也较 B 组明显减少(2 h :0.250±0.074 比 0.390±0.069 ,6 h :0.340±0.043
比 0.670±0.120 ,12 h:0.470±0.072 比 1.360±0.112, 均 P <0.05);D 组活化 caspase-3 蛋白表达量 (0.720±
0.052 、1.060±0.109、1.8
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