HPV58型衣壳蛋白L1和L2基因的克隆表达及病毒样颗粒的装配.pdfVIP

一 1736 一 a1inJLabDiana，November，2010，Vol14，No．11 文章编号：1007—4287(2010)11—1736—04 HPV58型衣壳蛋 白L1和 L2基 因的克隆表达 及病毒样颗粒的装配 王丽娜 ，陈 伟 ，甘义明 ，刘艳丰 (1．吉林大学第一医院妇产科 ，吉林 长春 130021；2．吉林大学中 日联谊医院骨科 ，吉林 长春 130031； 3．吉林大学附属医院 放射线科 ，吉林 长春 130021) 摘要：目的 大量表达和纯化HPV58衣壳蛋 白，形成病毒相似颗粒。方法 制备携带HPV58L1和 I2基因的重组 杆状病毒，转染昆虫细胞，在真核细胞中大量表达HPV58L1和 I2蛋 白并进行纯化。电镜观察病毒相似颗粒的形成情 况。免疫小鼠制备特异性抗血清。结果 HPV58L1和 I2蛋白在真核细胞中被高效表达，电镜下见表达纯化的病毒衣 壳蛋白IJ1与L2共同组装形成病毒相似颗粒 (VLPs)，用其免疫小鼠能产生针对HPV58L1蛋白的高滴度的特异性抗体。 结论 在真核细胞中大量表达HPV58L1和 l2蛋白，纯化后能形成病毒相似颗粒 ，并具备很强的免疫原性，有望用其 制作宫颈癌预防性疫苗。 关键词：HPV58；病毒衣壳蛋白；病毒相似颗粒 (VLPs) 中图分类号：Q784 文献标识码 ：A GeneCloningandExpressionofttPV58CapsidProteinL1andi_2andtheVirus-LikeParticlesAssembt~g WANG M ， CHENWei，GANYi-Ming．(DepartmentofObstetricsandGynecology．theFirstHospital，fllinUniversity，Changchun130021，Chn／a) Abstract：Objective ExpressandpurificateHPV58capsidproteinquantity，tomakeittovires—likeparticles．Mothods Pre— parerecombination Baculovimswhich phore HPV58L1 and HPV5812 genic，transfection entomo-eyte，express HPV58L1 and HPV5821 proteinintheucaryoticcellquantitynadpurificatesimultaneous．Usetheectronmicroscopetoobservatehteconditionofhte formationofhtevirus-likeparticles．hmnunitymousepreparethespec~cantisera．Results HPV58L1andHPV58L2proteinarehigh expressedinhteeucaryotiecel1．bytheectronmicroscope．wecanseethepmificationviralcapsidproteinL1andL2raeconcomitance composehtevirus—likeparticles(VLPs)，useitsimmunitymousecanproductivehtehightiterspec击cantibodywhattoaimdirecdyat HPV58L1protein．Conclusion HPV58L1andHPV5821 proteincanbehighexpressedintheucaryoticcell，afterpurifieatedthey Cna productivehtevires—likeparticles，menawhile，theyareprovidedwiht powerfulimmtmogenieity．Theyraepromisinglytobemaked