酶工程技术实验论文.docVIP

武汉长江工商学院 生物酶工程技术论文 院： 工学院 专业： 生物工程 年级： 10 题目: α-淀粉酶的酶学性质研究 学生： 学号： 指导教师： 职称: 2013年 06 月02日 目 录 摘 要 3 关键词 3 Abstract 3 Key words 3 前言 3 1.材料与方法 4 1．1材料与设备 4 1.2绘制糖含量标准曲线 4 1.2.1试剂配制 4 1.2.2绘制糖含量标准曲线 4 2.α-淀粉酶酶学性质研究关键技术 5 2.1 α-淀粉酶最适温度研究关键技术 5 2.2 α-淀粉酶最适PH研究关键技术 6 2.3α-淀粉酶耐热性研究关键技术 7 2.4α-淀粉酶动力学常数（Km）测定研究 8 2.5α-淀粉酶相对分子质量测定研究 9 3.结论 10 参考文献 10 α-淀粉酶的酶学性质研究 摘 要：本实验通过研究α-淀粉酶的酶学性质，利用淀粉酶水解还原糖，还原糖能使3，5-二硝基水杨酸还原，生成棕色的3-氨基-5硝基水杨酸。淀粉酶活力与还原糖的量成正比，用比色法测定淀粉酶作用于淀粉后生成的还原糖的量，以单位质量样品在一定时间内生成还原糖的量表示酶活力。酶的活性又同时受到温度、PH、激活剂抑制剂等的影响。设计单因素试验研究α-淀粉酶的最适条件，采用SDS法测定α-淀粉酶相对分子质量，结果如下：最适温度为60℃，最适PH为7.5，耐热性较好，100℃时α-淀粉酶仍有活力，动力学常数（Km） 关键词：α-淀粉酶 活力 温度 PH 耐热性 动力学常数 相对分子质量 Enzymatic Properties of Mesophilic α-Amylase Abstract：α-Amylase was purified to electrophoretic homogeneity. The molecular weight ofthe purified α-amylase is 58 kD. Its optimum pH value of is in the range from 5.5 to 6.5,and the optimum temperature is 60 ℃.With in 24 h at room temperature 80% enzyme activity keeps in the pH range from 7.0 to 10.0. The most enzyme activity loseswithin 15 min at 55 ℃. But, the enzyme would be stable for 1 h with the presence of 10 mmol/L Ca2+. EDTA inhibits the enzyme activity, while, Ca2+, Mn2+ and Co2+ ions are activators. Km and Vmax of α-amylase to soluble starch is 4.33 g/L and 1.19 g/L·min, respectively. The main hydrolysates to soluble starch are oligosaccharides and dextrin. Key words：Bacillus amyloliquefaciens；α-amylase；purification；characterization property 前言： 淀粉酶是水解淀粉和糖原酶类的总称。 α-淀粉酶（α-1,4-D-葡萄糖-葡萄糖苷水解酶），普遍分布在动物、植物和微生物中，是一种重要的淀粉水解酶。它以随机作用方式切断淀粉、糖原、寡聚糖或多聚糖分子内的α-1,4葡萄糖苷键，产生麦芽糖、低聚糖和葡萄糖。 不同来源的α-淀粉酶的酶学性质和理化性质有一定的区别，它们的性质对其工业应用的影响也较大，在工业生产中要根据需要使用合适来源的酶，因此对淀粉酶性质的研究非常重要。本实验所使用的是由芽孢杆菌深层发酵提取而得到的α-淀粉酶，是一种高效性的淀粉酶，具有较高的催化能力，可用于制备糊精、麦芽糖、葡萄糖等，其最适反应温度为50℃-75℃，最适PH范围为5.5-7.5，耐热性为在100℃仍有少量活性，动力学常数Km值为1.74g/L，采用SDS法测定α-淀粉酶相对分子质量。通过研究淀粉酶的性质，能使我们更好的了解它，并充分利用于工业生产、食品加工、医疗等产业。 1.材料与方法 1．1材料与设备 材料: α-淀粉酶；可溶性淀粉，硫酸，葡萄糖