干旱胁迫下新源1 号新疆野苹果抑制性差减文库的构建与初步分析.pdfVIP

农业生物技术学报，2010 年，第 18 卷，第 1 期，第 149-155 页 Journal of Agricultural Biotechnology, 2010, Vol.18, No.1, 149-155 研究资源 A Resource 干旱胁迫下新源1 号新疆野苹果抑制性差减文库的构建与初步分析 1 1 2 1 1 1* 徐彦 钟翡 廖康 李芳 王惠庭 李天红 1 中国农业大学农农学与生物技术学院果树系, 北京市果树逆境生理与分子生物学重点开放实验室, 北京, 100193; 2 新疆农业大学林学与园艺 学院, 乌鲁木齐, 830052 * 通讯作者, lith@cau.edu.cn 摘 要 为分离和鉴定新疆野苹果(MalussieversiiRoem.)根组织干旱胁迫条件下差异表达的基因，以苗龄 为3 个月的新源1 号新疆野苹果水培苗为材料，应用20% PEG 6000 溶液处理模拟干旱胁迫，利用抑制性差 减杂交(SSH) 的方法构建了新疆野苹果根组织干旱胁迫诱导表达差减文库(正库)和抑制表达差减文库(反 库) 。正库和反库随机各挑菌500 个，菌落PCR 显示插入片段在250~1 000 bp 之间。测序鉴定后共得到268