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186 Labeled Med，Jun．2008，V01．15，No．3 Immunoassays＆Clin ·检测技巧· ELISA测定中影响因素简析 李卫杨 (株洲市第一医院，湖南株洲412000) ELISA方法被广泛用于各种抗原和抗体测热血清使Clq灭活[1]。 定。但ELISA测定中影响因素较多，而且其操作 1．1．3嗜异性抗体人类血清中含有能与啮 中有一定的技术要求，在临床检验中如果处理不 齿类动物(如鼠等)Ig(s)结合的天然嗜异性抗体， 当，会出现一些错误结果(即假阳性或假阴性结 可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来，也能造 成假阳性。解决的办法是：可在标本稀释液中加入 果)。引起ELISA测定错误结果的原因主要有：① 标本因素；②操作因素；③试剂因素。本文主要就 过量的动物Ig(s)，但加入量不足或亚类不同时无 效。 标本因素和操作因素对ELISA测定的影响做如下 讨论。 1．1．4嗜靶抗原的自身抗体抗甲状腺球蛋 1 标本因素 白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体，有时能与靶 抗原结合形成复合物，在ELISA方法中均可干扰 血清是最常用的ELISA标本，血浆一般可视 为与血清同等的标本。标本引起的假阳性和假阴 抗原抗体测定结果。为避免以上情况出现，测定前 性结果主要是干扰性物质所致，分为内源性干扰物 需用理化方法将其解离后再测定。 质和外源性干扰物质两种。 1．1．5医源性诱导的抗鼠Ig(s)抗体临床采 1．1内源性干扰物质 用鼠源性CD3等单克隆抗体治疗，用放射性同位素 有人认为大约40％的人血清标本中含有非特 标记鼠源性抗体的影像诊断及靶向治疗等新技术， 均有可能使这些病人体内产生抗鼠抗体；另外，被 异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果。常见 的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜 鼠等啮齿类动物咬伤的病人体内也可以产生抗鼠 靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig(s)抗体、 的办法是：测定抗原时，在标本中加入足量的正常 交叉反应物质和其它物质等。 鼠Ig(s)，从而克服由于上述原因造成的假阳性。 1．1．1类风湿因子人血清中IgM、IgG型类 1．1．6交叉反应物质类地高辛、类AFP样物 风湿因子(RF)可以与ELISA系统中的捕获抗体 质等，是与靶抗原有交叉反应的物质。在用多抗测 及酶标记二抗的FC段直接结合，从而导致假阳 定抗原时对测定结果影响不大，但在用单克隆抗体 性。解决该情况的办法是：①用F(ab)2替代完整 测定抗原时，如果交叉抗原决定簇正好是所用单克 min)IgG 的IgG；②标本用偶联有热变性(63℃，10 隆抗体相对应的靶决定簇时，也会