肺结核患者粪便TB—DNA提取方法的应用比较.pdfVIP

检验 医学与临床 2012年5月第9卷第 1O期 LabMedClin，May2012，Vo1．9，No．10 · 论 著 · 肺结核患者粪便 TB—DNA提取方法的应用比较 吴 驰，黄慧谦 ，陈建波，罗 凯，肖颜玉，叶飞娣 ，单万水 (广东省深圳市第三人民医院 518112) 【摘要】 目的 比较煮沸裂解法、酚 ／氯仿法和试剂盒法 3种 DNA提取法在肺结核患者粪便标本 中检测 TB- DNA 的应用效果 。方法 收集肺结核患者粪便标本 ，分别用煮沸裂解法、酚 ／氯仿法和试剂盒法提取 DNA，比较其 T DNA 实时荧光聚合酶链反应 (PCR)扩增的检测 阳性率及扩增效率 ，分析不同方法 的差异。结果 对于痰抗酸 涂片阴性患者的粪便标本，3种方法均未测到有TB_DNA扩增。痰抗酸涂片阳性患者的粪便标本，煮沸裂解法、酚 ／ 氯仿法和试剂盒法的TB_DNA检 出率分别为 45 、7O 和 8O 。酚 ／氯仿法与试剂盒法 T DNA 的定量结果 比 较 ，存在显著性差异，试剂盒法提取扩增效果显著强于酚 ／氯仿法。结论 试剂盒法可有效去除粪便标本 中的PCR 抑制物 ，TB_DNA检 出率和定量结果明