抗幽门螺杆菌蛋黄免疫球蛋白IgY的制备及生物活性的研究.pdfVIP

第37卷 第2期 贵 阳 医 学 院 学 报 Vo1．37 No．2 2012年4月 JOURNAL OFGUIYANG MEDICAL COLLEGE 2012．4 抗幽门螺杆菌蛋黄免疫球蛋 白IgY的制备及生物活 性的研究术 许春杏 ，张永宏h ，陈峥宏 ，谢国文 ，张维森 ，杨 杰 ，张 健 (1．贵阳医学院附院消化内科，贵州 贵阳550004；2．贵阳医学院微生物学教研室，贵州 贵阳 550o04) [摘 要]目的：从免疫了幽门螺杆菌(Hp)抗原的母鸡蛋黄中提取抗Hp-IgY。方法：用超声破碎的Hp抗原 免疫21周龄罗曼产蛋母鸡，取免疫后所产鸡蛋卵黄，利用水稀释法加硫酸铵盐析方法，提纯IgY，ELISA间接法 检测抗体效价，Bradford法检测抗体蛋白含量，SDS．PAGE法检测其相对分子质量及纯度。结果：母鸡初次免疫 后第7天，抗体效价即渐渐升高，约第45天达到高峰；蛋黄抗体经纯化后，抗Hp-IgY蛋白纯度可达90％以上，含 量为6．25s／L。结论：用超声破碎的Hp抗原免疫母鸡，盐析法提纯免疫母鸡产蛋黄中的抗Hp-IsY，可获得高纯 度及高效价的抗Hp的特异性蛋黄抗体。 [关键词]螺杆菌，幽门；超声处理；卵黄；免疫球蛋白类；鸡 [中图分类号】R392 [文献标识码】A [文章编号]1000-2707(2012)02-0134-03 A StudyonPreparation ofAnti-helicobacterPyioriEgg Yolk IgY andItsBiologicalActivity XU Chunxing ，ZHANG Yonghong一 ，CHENZhenghong。 XIEGuowen ， ， ZHANGWeisen ，YANGJie，ZHANGJian (J．DepartmentofGastroenterology，theAffiliatedHospitalofGuiyangMedicalCollege，Guiyang550004，Gukhou，China； 2．DepartmentofMicrobioloyg，GuiyangMedcialColelge，Guiyang550004，Guizhou，China) [Abstract]Objective：Toextractandpurifyanti-helicobacterpyloriIgYfromeggyolkofhensimmu— nizedbyHelicobacterpylori(HP)．Methods：HPantigensubjectedtoultrasoniCationwasusedtoim- mune21weeksoldRomaneggproductionhens．IgY inimmunizedyolkwasisolatedbywaterdilution methodcombinedwithammonium sulfatesaltingoutmehtod．ItstiterwasdetectedbyindirectELISA． TheproteinamountwasmeasuredwithBrafordmethod．Th epurityandmolecularweightofIgY were measuredwithSDSmethod．Results：Sevendaysafterthefirstimmunization，theIgY titer graduallyincreased，andreachedthepeakonthe45thdays．Afterpurification，thepurityofIgYwas morethan90％ ，andhteproteincontentwas6．25g／L．Conclusions：Inthisway，anti-HP IgYwith highpurityandtiterhasbeenprepared． [Keywords]Helicoba