大鼠中药血清对骨关节炎患者膝关节软骨细胞胶原和金属蛋白酶mRNA表达的影响.pdfVIP

穷 大鼠中药血清对骨关节炎患者膝关节软骨细胞胶原 和金属蛋白酶mRNA表达的影响 徐华明 ·孟祥奇 1,2 姜 宏 黄桂成 惠扔华 马奇翰 陈咏真 曹 莉s 汤晓晨 (1．苏州市中医医院，江苏苏州215009；2．南京中医药大学，江苏南京 210046； 3．苏州大学医学院，江苏苏州215000) 摘 要 目的：观察祛痰除湿剂对原代培养骨关节炎(OA)患者的膝关节软骨细胞中Ⅱ型胶原、X型胶原和相关代 谢酶MMP一1、MMP一3、MMP一13mRNA表达的影响．探讨祛痰除湿剂治疗骨关节炎的作用及其机制。方法：原代培养骨关 节炎患者的膝关节软骨细胞 ．用第三代细胞进行试验。关节软骨细胞经含药血清作用72h后 ．采用RealTime—PCR法检 测细胞 中II型胶原 (ColII)、X型胶原(ColX)、基质金属蛋 白酶一1、基质金属蛋 白酶一3(MMP一3)、基质金属蛋 白酶一13的 mRNA表达。结果：0A患者膝关节软骨细胞经祛痰除湿剂含药血清作用后 ColIImRNA表达明显高于仅使用胎牛血清 培养 的空白对照组 ，经 10％祛痰除湿剂含药血清作用后 ColX及 MMP一1、MMP一3、MMP一13mRNA表达均明显低于空 白对照组。结论 ：祛痰除湿剂可调节OA 患者关节软骨 中胶原及相关金属蛋 白酶 (MMPs)的mRNA表达 ，从而对退变的软 骨细胞有一定的修复作用并可延缓关节软骨细胞的进一步退变。 关键词 骨关节炎 祛痰除湿剂 关节软骨细胞 胶原 基质金属蛋 白酶 实验研究 中图分类号 R684．3 文献标识码 A 文章编号 1672—397X(2012)12—0075—03 骨关节炎 (OA)是导致 50岁以上人群关节功能障碍的主 13(MMP一13)的mRNA表达 ，从而分析祛痰除湿剂对 OA患 要疾病之一。我们运用中药复方祛痰除湿剂治疗 0A多年，具 者关节软骨功能的影响，初步探讨其治疗作用机理，现报告 有很好的临床效果。骨关节炎的始动因素是关节软骨退变。 如下。 我们成功分离并原代培养了骨关节炎患者的关节软骨细胞． 1 材料与方法 利用大 鼠制备含祛痰除湿剂中药血清，采用RealTime—PCR 1．1 试剂 胰蛋 白酶、高糖 DMEM培养基、胎牛血清 (杭州 法检测在祛痰除湿剂含药大 鼠血清作用 72h后关节软骨细 四季青公司)；TRizol试剂 (美 国Sigma公司产 品)；逆转录酶 胞 中II型胶原 (ColII)、X型胶原 (ColX)，基质金属蛋白酶一 (北京天根生化科技有限公司)；引物序列 (华大基因生物技 1(MMP一1)、基质金属蛋 白酶一3(MMP一3)、基质金属蛋 白酶一 术有限公司)；祛痰除湿剂(苏州市中医医院药剂科煎制)。 基金项 目：江苏省 中医药局计划项 目(HZ07089) 本研究结果显示 ，模型组各时间段大 鼠大脑皮质 IL一1RI 瘤坏死因子一 和 白细胞介素一1B表达的影响．中华急诊医学杂 和 TNFR—I的蛋 白均异常升高，且随时间的延长而更加 明显． 志 ，20o5，14(2)：119 而醒脑开窍针刺组能降低这种异常增高的表达 ，该作用也随 [3] ChenXW，Ashfaq S．Involementofinflammation cytokinesin 时间的延长而更加显现。非穴位针刺组的情况和模型组大体 centralnervoussystem injury．Prog．Neurolobiol，2002，67：161 [4】 李浩，毕桂南，罗传铭 ．鼠脑缺血再灌注损伤炎症反应及环磷酰 相仿。该结果表明，醒脑开窍针刺法能降低大鼠缺血再灌注 胺影响．中风与神经疾病杂志，2006，23(5)：541 后脑组织异常升高的 IL一1RI、TNFR—I的蛋 白质表达 ，该作用