动物病原高通量检测技术.pdfVIP

动物医学进展 ，2011，32(10)：1103—106 ProgressinVeterinaryM edicine 动物病原高通量检测技术 朱丽萍 ，颜世敢0 (1．山东轻工业学院食品与生物工程学院，山东济南 250353；2．山东省农科院畜牧兽医研究所 山东省动物疫病防控与繁育重点实验室，山东济南 250100) 摘 要 ：当前规模化养殖业迫切 需要动物病原检测技术高通量化。高通量检测技术具有高通量、自动 化 、微量化等特点。病原高通量检测技术可分为高通量免疫学检测 (检测抗原)和高通量分子生物学检测(检 测核酸)两大类。论文对近年来报道的用于动物病原高通量检测的基 因芯片技术、抗体芯片技术、液相芯片 技术、流式细胞术多色荧光分析技术 、变性高效液相色谱技术等新技术从原理 、特点及应用等进行 了综述。 关键词 ：高通量检测；液相芯片；抗体芯片；流式细胞术 ；基 因芯片；变性高效液相色谱技术 ；病原微生物 中图分类号 ：$854．43 文献标识码 ：A 文章编号 ：1007—5038(2011)10—0103—04 高通量检测技术是在免疫学、微生物学、生物化 ptm 的聚苯乙烯微球标记上编码多达 100多种的荧 学、分子生物学等学科最新研究成果 的基础上发展 光染料后成为编码荧光微球 ，以此为反应载体，以流 起来的，借助 自动化操作系统执行检测过程 ，通过快 式细胞仪作为检测平 台，在液相 中完成对各种抗原 速 、灵敏的检测仪器采集实验数据并用计算机对数 的高通量检测 ，因此液相芯片又称悬浮芯片 (SUS— 据分析处理，实现大量样 品快速检测的新技术 。高 pensionarray)。液相芯片具有快速、灵敏 (0．01 通量检测技术具有高通量、自动化、微量化、快速、灵 Pg)、重 复性好 、检测 范 围宽 (0．2pg／mL～32000 敏、精确等特点。病原高通量检测技术可分为高通 pg／mL)、微量(10 L)、高通量、检测成本低、操作简 量免疫学检测技术 (检测抗原)和高通量分子生物学 单的优点。 检测技术 (检测核酸)两大类 。前者有液相芯片、抗 液相芯片可用于多种动物病原感染 的检测。朱 体芯片、流式细胞术等；后者有基 因芯片、变性高效 海红等[1采用液相芯片技术建立 了56种常见细菌、 液相色谱技术等 。 病毒高通量检测平台。詹爱军等 3]建立 的新城疫 我 国养殖业 的集约化程度越来越高，养殖规模 病毒、鹿流行性 出血热病毒、阿卡斑病毒 、蓝舌病病 越来越大，随之而来 的流行病学调查、临床检测 、检 毒、水疱性 口炎病毒液相芯片检测技术，检测灵敏度 验检疫的样品数量逐年增加 ，传统的检测方法和技 达到 50TCID5o～lOOTCID5。。夏骏等[4]利用液相 术已经难 以适应当前的生产需要，迫切要求动物病 原检测实现高通量化。本文对近年来报道的高通量 芯片技术检测 H5N1亚型禽流感病毒 的灵敏度达 检测新技术从原理、特点及其在动物病原检测中的 lOpg。王静等[5检测 鼠疫菌 的液相芯片在浓度为 应用进展进行了综述 。 0．154ng／mL~4514ng／mL的范 围内具有 良好 的 1 高通量免疫学检测技术 动力学响应 ，液相芯片的灵敏度 比ELISA法高 2个