果糖磷酸钠中乙醇含量的测定.pptVIP

果糖磷酸钠中乙醇含量的测定 黄雪琴 温微微 目的 原理 方法---顶空进样法 结果与讨论 实验目的 熟悉气相色谱仪的工作原理和操作方法 了解顶空气相色谱仪的工作原理 学会用气相色谱法测定药品中的有机物(乙醇)含量 掌握内标法计算杂质含量 实验原理 气相色谱法:采用气体为流动相(载气)流经装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法.物质或其衍生物气化后被载气带入色谱柱进行分离,各组分先后进入检测器,用记录仪、积分仪或者数据处理系统记录色谱信号. 所用的仪器为气相色谱仪,气相色谱仪由载气源, 进样部分,色谱柱,柱温箱,检测器和数据处理系统组成.进样方式可分为溶液直接进样或顶空进样, 本实验采用顶空进样法. 顶空进样实验原理 顶空进样是通过样品基质上方的气体成分来测定易挥发或者沸点低的组分在原样品中的含量.是一种简单而有效的样品检测方法. 顶空进样根据取样和进样的方式不同分为静态和动态.本实验采用静态的方法. 静态顶空:将样品溶液密封在一个容器中在一定温度下加热一段时间使气液两相达到平衡,然后取气相部分进入GC分析. 实验过程 实验仪器及色谱条件: 溶液的配制 样品溶液:果糖磷酸钠(精密称取0.2024g→100ml) 内标(甲醇)溶液:1%甲醇(1→100) 对照(乙醇)溶液:1%乙醇(1→100) 超纯水 具体步骤 校正因子测定溶液的配制 50ul甲醇溶液+100ul乙醇溶液→10ml容量瓶中用水稀释至刻度.2ml/瓶,5瓶. 供试品溶液的配制 ⅰ50ul甲醇溶液+1ml上述样品溶液→10ml容量瓶中用水稀释至刻度.(预实验) ⅱ2ml上述样品溶液+ 5ul甲醇溶液→顶空样品瓶. 2ml/瓶,5瓶. 甲醇（0.1%）定位液1瓶；乙醇（0.1%）定位液1瓶；校正溶液，供试品液各5瓶。 总共12瓶置于Loop环上，自动进样测定． 定位溶液??色谱图 F测定??部分色谱图 供试品测定??预实验色谱图 供试品测定??部分色谱图 实验结果 f的数据处理结果: f1=0.65760 f2=0.66624 f3=0.61519 f4=0.68867 f5=0.61718 F平均=0.64897 RSD=4.93% 供试品含量数据处理结果: C1%=0.068% C2%=0.072% C3%=0.068% C4%=0.071% C5%=0.074% C平均%=0.071% RSD=2.9% 讨论 实验中出现的问题: 1.柱温的影响(45℃→50℃) 2.浓度的影响(样品稀释1000倍,内标稀释20000倍 →样品稀释100倍,内标稀释40000倍) 3.流速的影响(1.0ml/min →0.8ml/min → 1.0ml/min) 4.平衡温度和平衡时间的影响 90 ℃→80℃;20min→15min 感想 实验前准备------充分! 实验态度-------耐心! 启发-----独立思考,考虑全面! G-C6890气相色谱仪 色谱柱:HP-5毛细管柱(5%phenyl methyl siloxane,30mx0.5mm) 初始柱温:50℃ 气化室温度：180℃， 检测器温度：200℃(FID). 载气:氮气1.0ml/min,分流比5:1 氢气流量:45ml/min, 空气流量:450ml/min, 尾吹气(氮气):20ml/min, 平衡温度:80℃,平衡时间:15min. 甲醇 乙醇 甲醇 乙醇 甲醇 乙醇 8.91 121679 0.79 7.42478 4.94 　 　 109260 0.73 2.29113 4.447 标5 8.98 124772 0.78 7.53329 4.94 　 　 109232 0.7 2.59399 4.447 标4 9.03 124690 0.78 7.8357 4.938 　 　 112106 0.7 2.41023 4.445 标3 8.98 121649 0.77 7.79637 4.939 　 　 112140 0.71 2.59712 4.446 标2 8.92 121658 0.77 7.09116 4.94 　 　 109221 0.7 2.33156 4.446 标1 　 127828 0.82 97.41763 4.937 乙醇定位液(0.1%) 　 121254 0.77 49.04985 4.438 甲醇定位液(0.1%) R n 拖尾因子 峰面积A 保留时间t 　 f的测定数据 内标甲醇 乙醇 需测 内标甲醇 乙醇 需测 内标甲醇 乙醇需测 内标甲醇 乙醇需测 9.1 115982 0.82 1.20227 4.944 　 3.15 115133 0.7 5.60107 4.445 样