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现代食品检测技术 食品科学与工程系 §4-1 概述 原子吸收光谱分析 原子吸收分光光度法 原子吸收法 基于物质产生的原子蒸汽对特定谱线（通常是待测原子的特征谱线）的吸收来进行元素定量分析的一种方法。 §4-2 原子吸收光谱法基本原理 一、原理 1. 原子荧光光谱的产生 气态自由原子吸收特征辐射后跃迂到较高能级，然后又跃迁回到基态或较低能级。同时发射出与原激发辐射波长相同或不同的辐射即原子荧光。 原子荧光为光致发光，二次发光，激发光源停止时，再发射过程立即停止。 2．原子荧光的类型 原子荧光分为共振荧光，非共振荧光与敏化荧光等三种类型。 （1）共振荧光 气态原子吸收共振线被激发后，再发射与原吸收线波长相同的荧光即是共振荧光。它的特点是激发线与荧光线的高低能级相同，其产生过程见图（a）中之A。 如锌原子吸收213.86nm的光，它发射荧光的波长也为213.86nm。若原子受热激发处于亚稳态，再吸收辐射进一步激发，然后再发射相同波长的共振荧光，此种原子荧光称为热助共振荧光见图（a）中之B。 （2）非共振荧光 当荧光与激发光的波长不相同时，产生非共振荧光。非共振荧光又分为直跃线荧光、阶跃线荧光、anti Stokes荧光。 （3）敏化荧光 受光激发的原子A与另一种原子B碰撞时，把激发能传递给B原子使其激发，后者再以辐射形式去激发而发射荧光即为敏化荧光。火焰原子化器中观察不到敏化荧光（要求A原子浓度很高），在非火焰原子化器中才能观察到。 在以上各种类型的原子荧光中，共振荧光强度最大，最为常用。 3. 荧光强度 If =φIa If荧光强度, φ为荧光量子效率, Ia吸收光的强度. A为有效面积, I0 为单位面积上光的强度, l为吸收光程长,N为基态原子数,ε为峰值吸收系数. 展开方程, 忽略高次时, 可得： If = φAI0ειN If = kC 4．量子效率与荧光猝灭 量子效率： φ = φf/φA φf 单位时间时内发射的荧光光子数 φA 单位时间内吸收激发光的光子数 φ 一般小于1。 荧光猝灭 受激原子和其他粒子碰撞，把一部分能量变成热运动与其他形式的能量，因而发生无辐射的去激发过程。 可用氩气来稀释火焰，减小猝灭现象。最好采用氢火焰，并以氩气-氧气代替空气（N2、CO2、CO、H2O、OH都是荧光猝灭剂）。 §7-1 气相色谱法概述一、色谱法的由来 1906年由俄国植物学家Tswett创立，用来分离植物色素，见图示。 现在：一种重要的分离、分析技术，分离混合物各组分并加以分析。 二、何谓色谱法？目的？ 色谱法是一种分离技术 试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行分配，从而实现混合物分离、分析的一种方法。 其中的一相固定不动，称为固定相； 另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。 目的：定性分析、定量分析 （4） 检测及记录系统 （5） 温度控制系统 §7-2 气相色谱法理论基础 一、色谱分离过程 2. 色谱峰的正态分布 在气相色谱中，塔板数n是很大的，此时流出曲线可趋近于正态分布曲线，这样流出曲线C与时间t 的关系可由下式表示： 2. 分离度及影响因素 分离度：相邻两色谱峰保留时间之差与两峰峰底宽度平均值之比。（衡量色谱分离的好坏程度） R≥1.5 作为相邻两峰完全分离的标志 反映了热力学因素（选择性） 反映了动力学因素（柱效能） R把分离程度定量化了，故可作柱总分离效能指标。 令Y2=Y1（相邻两峰的峰底宽近似相等），且假设相邻两组分的n一致（n有效(1)=n有效(2)），则可导出下式： 色谱分离 基本方程式 色谱分离 基本方程式 柱效项 柱选择性项 柱容量项 k 影响峰位 n 影响峰宽窄 α影响峰间距 k 容量因子（ k‘ ）、柱效（n）及选择因子（ α ）对分离度的影响 讨论： 增加柱效n（增加柱长；降低板高）可提高R。 α＝1，没有戏！ R≥1.5, 全分离。 柱选择性取决于固定相性质和柱温。 改变柱温和改变相比可使k值改变。 [例] 已知物质A和B在一个1m柱上的保留时间分别为5.80和6.60min，峰底宽分别为0.78和0.82 min。不被保留组分通过该柱的时间为1.10min。计算: （1）载气的平均线速度； （2）组分B的分配比； （3）分离度; （4）柱的平均有效塔板数及有效塔板高度; （5）达到完全分离时所需的柱长