仿刺参补体B因子溶血活性初步研究.pdfVIP

第26卷 第 10期 现 代 渔 业 信 息 Vo1．26 No．10 2011年 10月 M ODERN FISHERIES D FoRM ATION Oct．，2011 仿 刺 参 补 体 B 因子 溶 血 活 性 初 步 研 究 钟 磊 张 峰 。 毕 颖 (大连海洋大学生命科学与技术学院) 中国辽宁省大连市 邮编：116023 【提要 】本文应用高等哺乳动物血清补体B因子溶血检测技术检测仿刺参个体体内补体B因子。通过溶血法检测了健康仿 刺参以及人工诱导化皮仿刺参体腔液补体B因子活性。结果显示仿刺参体腔液有补体B因子存在，且含补体B因子仿刺参体腔 液溶血活性明显高于去补体B因子体腔液的溶血活性。实验对仿刺参体腔液进行加热处理结果显示其补体B因子是对热不稳定 的分子，此特性与高等哺乳动物B因子特征相同。仿刺参体内存在补体B因子，它与脊椎动物补体B因子性质相似，在免疫旁路 途径中起重要作用。 钟 磊等，2011。仿刺参补体B因子溶血活性初步研究，《现代渔业信息》杂志，26(10)：22—24，32。 关键词 ：补体B因子；棘皮动物；仿刺参 ；溶血活性 1 引言 补体旁路活化途径的测定，是利用EDTA对 ca2+的鳌合作用 较强而对M 鳌合能力较弱从而阻断补体的经典活化途径 补体 (complement，C)是免疫学研究中的最古老的领域 与凝集素活化途径。运用补体B因子可以启动旁路途径使异 之一 ，是存在于人和动物血清中的一组蛋白质 ，是人体内一 种血细胞溶血的原理对健康海参的体腔液的B因子进行溶 类重要的、具有生物活性的非特异性免疫调节因子。其主要 血检测，并测定溶血活性。加入可使B因子活化的羊血红细 功能是促进机体免疫功能的发挥，增强免疫效应。其前体一 胞，导致补体旁路途径激活，羊血红细胞损伤而发生溶血。 般存在于血清中，被激活后各组分按一定顺序发生连锁反 补体分子是热敏感因子，当温度达到56％时补体分子失活 应 ，表现出杀菌、吞噬等生物学效应。 不能发生溶血现象，含有未失活的补体分子的血细胞悬液 B因子(BF)是补体旁路活化途径的关键酶前体物，是 会发生溶血。 一 种补体分子。从1959年Bum等在研究酵母多糖消耗补体 本实验旨在通过溶血法来确定棘皮动物中存在B因子， 第3成份 (c3)过程中发现BF后 ，许多学者相继对该因子进 并查明其活性。 行了较为详尽的研究¨J。有关脊椎动物补体系统的研究报道 较多，关于棘皮动物补体系统的研究，国外主要集中在海胆 2 材料及方法 等少数棘皮动物上，如Bertheussen 研究发现，海胆体腔液 中存在补体样活性；Gross等 研究发现，紫海胆Strongy— 2．1材料 locentrotuspurpuratus体内存在类似于脊椎动物补体系统中 羊血，健康绵羊中采取 ，大连医科大学实验动物基地提 一 个重要成分c3的因子，称其为SpC3。近年来的研究证明， 供 ；仿刺参 ，平均体重300g，实验室暂养，用沙滤海水培育， 棘皮动物体内可能存在有补体旁路免疫机制 ，B因子是启 水温为 16℃。 动旁路途径的重要因子。 2．2 试剂及药品 ． 在动物体内经典途经是第一个被发现的补体激活途经， 蒸馏水、NaC1、巴比妥，巴比妥钠 、氢氧化钠、EDTA、 由结合在细胞表面的抗体激活，同时需要ca和M 的参 六水合氯化镁。 与；旁路途经不依赖于抗体 ，可直接 由c3或微生物表面的 试剂配制： 特定结构激活 ，只需要Mg2；199