miR-200a通过靶向NCAM1基因影响胶质瘤细胞迁移及侵袭.pdfVIP

398 　　肿瘤2013 年5 月第33 卷第5 期　TUM OR Vol. 33, May 2013 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2013.05.003 Copyright© 2013 by TUM OR Basic Research 基础研究 · miR-200a通过靶 向NCAM 1基 因影响胶质瘤细胞的迁移及侵袭 1, 2 2 1, 2 2 2 2 刘　锋 ，王占祥 ，黄才权 ，沈上杭 ，徐　昊 ，张绍林 1. 福建医科大学第一临床医学院，福建福州　350005 ；2 . 厦门大学附属第一医院神经外科，福建厦门　361003 [ 摘要 ]　目的：研究微小 RNA （microRNA ，miRNA ）-200a 在�神经胶质瘤 U87 ��迁移�侵袭中的作用及其 可能的机制。方法：利�用 LipofectAMINETM 2000 瞬时转染 has-miR-200a 模拟� （mimic ）、has-miR-200a 抑制� （inhibitor ）及阴性对照 （hsa-miR-negative control ），�别上调�下调 U87 ��中 miR-200a 的表达；采用划痕实 验� Transwell 小室法检测 miR-200a 对 U87 ��迁移及侵袭能力的影响。利�用在线 miRNA 靶基因预测软件预测 miR-200a 的靶基因，并采用荧光素酶报告系统及蛋白质印迹法对预测的潜在靶基因进行验证。结果：外源性过表 达 miR-200a 可促进 U87 ��迁移�侵袭能力，而下调 miR-200a 的表达则可抑制 U87 ��的迁移�侵袭，与对 照组比较差异均有统计学意义 （ P ＜ 0.05 ）。荧光素酶报告系统�蛋白质印迹法检测结果均提示，神经��黏附� 子 （neural cell adhesion molecule ，NCAM 1 ）基因的蛋白表达受 miR-200a 的负调控，是其调控的靶基因。结论： miR-200a 可以�过靶向调控 NCAM1 的表达进而促进 U87 ��的迁移�侵袭。 [ 关键词 ]　神经胶质瘤；微RNAs ；细胞迁移分析；神经细胞黏附分子类 [中图分类号]　R739.41 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2013) 05-0398-06 The miR-200a influences the migration and invasion abilities of glioma cells by targeting NCAM 1 gene 1, 2 2 1, 2 2 2 2 LIU Feng , WANG Zhan-xiang , HUANG Cai-quan , SHEN Shang-hang , XU Hao , ZHANG Shao-lin 1. First Clinical Medical College of Fujian Medical University, Fuzhou 350005, Fujian Province, China; 2. Department of Neurosurgery, First Affiliated Hospital of Xiamen University, Xiamen 361003, Fujian Province, China [A BSTRACT]　Objective: To investigate the effects of miR(microRNA)-200a on migration and invasion abilities of glioma cells, and