课题3分解纤维素微生物分离.pptVIP

单击此处进入 随堂达标检测 旁栏思考题 1．本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？ 解析　本课题的选择培养可以提供目的微生物繁殖所需的条件，增加选择培养可以使实验的成功率更高。 答案　本实验流程与课题2的流程的区别如下：课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。 2．为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？ 答案　由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对较高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。 3．将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？ 答案　将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10 cm左右腐殖土壤中。 4．想一想，这两种方法各有哪些优点与不足？你打算选用哪一种方法？ 解析　两种方法各有优缺点，实践中可以根据需要选择不同的方法进行实验。 答案　方法一是传统的方法，缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用。方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是由于纤维素和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。 但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。方法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。 5．为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？ 解析　这里的选择培养的实质是富集培养，也就是提供了目的微生物生长繁殖的条件。 答案　在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。 练习 1．略。(开放性题目，答案合理即可) 2．提示　土壤取样→选择培养(此步是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定)→梯度稀释→将菌悬液涂布到有特定选择作用的培养基上→挑选单菌落→发酵培养。 * 热点考向示例 随堂达标检测 课堂互动探究 教科书问题解答 活页规范训练 * 热点考向示例 随堂达标检测 课堂互动探究 教科书问题解答 活页规范训练 课题3　分解纤维素的微生物的分离 课程标准 1.研究培养基对微生物的选择作用。 2.探讨微生物的利用。 课标解读 1.简述纤维素酶的组成及作用。 2.掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。 纤维素分解菌的筛选 复合 C1酶 Cx酶 葡萄糖苷酶 C1酶、Cx酶 葡萄糖苷酶 2．纤维素分解菌的筛选 (1)筛选方法： 法。 (2)筛选原理：刚果红可以与纤维素形成 ，当纤维素被 分解后，刚果红——纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现 ，我们可以通过 来筛选纤维素分解菌。 刚果红染色 红色复合物 纤维素酶 以纤维素分解菌为中心的透明圈 是否产生透明圈 [思维激活1] 纤维素分解菌的选择培养基中“选择因子”是什么？ 提示　纤维素分解菌中唯一的碳源是“纤维素粉”，唯有能利用纤维素的微生物方可在该培养基上生存，其他微生物将因缺乏碳源而无法生存，以此，可筛选到纤维素分解菌。 1．纤维素分解菌的筛选原理 即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 2．筛选过程中涉及的两种培养基 (1)纤维素分解菌的选择培养基 ①配方： 组分 含量/g 提供的主要营养 纤维素粉 5　 碳源、能源 NaNO3 1　 无机盐 Na2HPO4·7H2O 1.2 KH2PO4 0.9 MgSO4·7H2O 0.5 KCl 0.5 酵母膏 0.5 生长因子、碳源、氮源 水解酪素 0.5 氮源、生长因子 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL ②该培养基为液体培养基，利用液体选择培养基可增加纤维素分解菌的浓度。 (2)鉴别纤维素分解菌的培养基 ①配方： 组分 含量 提供的主要营养 CMC－Na 5～10 g 碳源 酵母膏 1 g 碳源、氮源、生长因子 KH2PO4 0.25 g 无机盐 琼脂 15 g 凝固剂 土豆汁 100 m