两种蛇毒C型凝集素的结构生物学研究.pdf

摘要 摘要 1．抗血小板药物候选蛋白agkisacucetin的结构研究 心血管疾病是一种严重威胁人类健康的疾病，引起心血管疾病的主要原因是 I 血栓。GPb．IX—V复合物是血小板表面重要的糖蛋白，在血小板粘附的最初阶 段，特别是在高切变应力条件下的粘附过程中起着关键作用，因此成为抗血栓药 物的重要靶标。agkisacucetin是一种从皖南尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化得到的一种 蛇毒C型凝集素，可抑制GPIb．VwF相互作用，从而具有抗血栓作用。同时体 内实验表明其不易在体内造成凝血障碍，因此是一种新型的抗血栓药物。 体结构，为阐明该蛋白抑制GPIb．VwF相互作用的分子机制提供了结构基础， 同时，通过电子密度图推断的晶体学序列对质谱分析的结果进行了验证和补充。 I agkisacucetin整体结构与另一个GPb结合蛋白flavocetin相似，但其不具有 flavocetin或echicetin的多聚机制，因此其与GPIb的结合抑制GPIb与vwF 的相互作用。 2．抗血管生成素2K001的结构研究 90％的癌症表现为实体瘤，而实体瘤的生长依赖于血管网络为其供应氧气和 营养物质。当肿瘤体积超过2～3mm3时，需要形成新血管才能继续生长，否则 肿瘤组织将保持休眠状态或发生退化。因此，通过抑制新血管生成来控制肿瘤生 长是一种极有希望的抗癌策略。 兆科药业(合肥)有限公司从皖南尖吻蝮蛇蛇毒中分离纯化得到一种蛇毒C 型凝集素2K001，在鸡胚绒毛尿囊膜实验中表现为明显的抑制血管生成作用，是 一种抗血管生成候选药物。 本论文对抗血管生成素2K001进行了晶体学研究，最终获得了其2．osh分辨 率的晶体结构，结合质谱分析结果，确定了其晶体学序列。通过结构比对，发现 其一级序列及三维结构都与一个整合素砣D1结合蛋白EMSl6非常相似。进一步 的实验证实2K001确实可与or2 1-dmain结合。整合素以B1在新血管生成过程中 起着重要作用，2K001可能通过该受体抑制新血管生成。这一发现为进一步阐明 其分子机制提供了线索和结构基础。 I 关键词：蛇毒c型凝集素GP b结合蛋白抗血管生成素整合素a2131尖吻蝮 蛇x射线晶体衍射晶体结构 I 摘要 Abstract Abstract 1．Structuralon anti-GPIb studyagkisacucetin，ansnaclec(snakeC—typelectin) from acutus Agkistrodon Plateletadhesiontoa bloodvesselistheinitial forarterial damaged trigger hemostasisand isasnake lectinisolatedfromthe thrombosis．AgkisacucetinC—type venom inhibits toGPIband ofAgkistrodonacutus阴．acutus)．It bybinding platelet theaccessofVWFtoGPIb．Wehavedeterminedthe structureof blocking crystal andrefinedto1．91 A．The agkisacucetin