P53在急性肾损伤小鼠肾脏的表达及其与细胞凋亡的关系.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 20l2，28(I1)：1971—1975 · 1971 · [文章编号】 1000-4718(2012)11—1971一o5 P53在急性 肾损伤小鼠肾脏的表达 及其与细胞凋亡的关系水 郭晓芳， 顾 勤 ， 刘 宁， 俞 隼 (南京大学医学院附属鼓楼医院ICU，江苏 南京 210008) [摘 要] 目的：探讨缺血再灌注致急性肾损伤(AKI)小鼠肾脏不同部位P53的表达及其与细胞凋亡的关 系。方法：采用随机对照动物实验方法 ，将 18只小鼠随机分为假手术组、AKI组及P53抑制剂pifithrin—Mpha(PFI’ 一 )组，每组6只。采用双侧肾蒂夹闭45rain后松开动脉夹的方法建立小鼠AKI模型，Pgr一0【组于建模前5min 腹腔注射PFTr一0【2．2mg／kg，并于建模后48h采血检测尿素氮和肌酐，取肾脏组织行HE染色观察肾组织病理学 变化，采用Westernblotting法测定 P53蛋白含量 ，免疫荧光法确定肾脏不同部位P53的表达，TUNEL法检测肾脏细 胞凋亡，免疫组化方法检测肿瘤坏死因子受体 (TNFR)、caspase一3及 Bel一2蛋白水平 。结果：(1)PFfI一0【组和 AKI组小鼠血尿素氮和肌酐水平均明显高于假手术组 ，而PFr—Ot组与AKI组比较血尿素氮和肌酐水平明显降低 (P0．05)；肾组织 HE染色显示假手术组肾组织细胞形态完整，排列整齐 ，无明显病理改变，AKI组肾小管上皮细 胞刷状缘脱落、空泡及滴状变性，皮髓质问有明显淤血带；PFT—a组肾小管上皮部分刷状缘脱落消失，空泡及滴状 变性减轻，皮髓质间无明显淤血带；(2)假手术组小鼠肾脏有少量P53表达且未检测到凋亡细胞 ，而AKI组小 鼠缺 血再灌注48h后 153蛋白水平及凋亡细胞明显增加 (P0．05)，并且均主要定位在肾皮质，PFT一仅组较AKI组小 鼠肾脏 153蛋白含量及凋亡细胞指数均减少(P0．05)；(3)与假手术组相 比，AK1组小鼠肾脏 TNFR蛋白及 caspase一3蛋白水平升高(P0．05)，Bcl一2蛋白水平下降(P0．05)，PFr—d组较AKI组小鼠肾脏 TNFR蛋白及 caspase一3蛋白水平降低(P0．05)，Bcl一2蛋白水平升高(P0．05)。结论：急性肾损伤时，肾组织P53表达增 加 ，主要定位于皮质 ，通过调控凋亡蛋白Bcl一2和TNFR的水平，促进caspase一3的释放，从而介导细胞凋亡。 [关键词] P53；急性肾损伤；Pifithrin—alpha；细胞凋亡；缺血再灌注 [中图分类号] R365 [文献标志码] A d0i：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．11．010 RelationshipbetweenapoptosisandchangeofP53expressioninmousere- naltissuesafteracutekidneyinjury GUOXiao—fang，GUQin，UUNing，YUSun (DepartmentofIntensiveCareUnit，DrumTowerHospital，MedicalSchoolofNanjingUniversity，Nanking210008，China． E—mail：ICUGuQin@yahoo．corn．cn) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetherelationshipbetweenrenalcellapeptosisinducedbyischemia／reperfusion injuryandtheactivationofP53．METHODS：Eighteenmicewerernadomlydividedinto3groups：sham operationgroup， acutekidneyinjury(AKI)groupandpifithrin—alpha(PFT一0)【treatmen