白藜芦醇对抗D-半乳糖诱导的心肌细胞衰老及其机制.pdfVIP

查 望 ! 里 of ysiology 2012，28(12)：2141—2146 · 2141 · [文章编号] 1000—4718(2012)12—2141—06 白藜芦醇对抗D一半乳糖诱导的 心肌细胞衰老及其机制木 过华蕾，廖丽贞， 陈燕玲， 吴伟康 (中山大学中山医学院病理生理教研室，广东 广州 510080) [摘 要] 目的：探讨白藜芦醇对 D一半乳糖诱导的心肌细胞衰老的影响及其可能机制。方法 ：用不同浓度 D一半乳糖 (0、0．1、1、10和 100g／L)作用不同时间(O、12、24、48和72h)诱导原代心肌细胞衰老，通过 B一半乳糖 苷酶染色法鉴定细胞衰老 ，MTr法检测细胞活力 ，FDG法半定量检测 B一半乳糖苷酶含量，构建体外心肌细胞衰老 模型。根据FDG的结果来评估不同浓度白藜芦醇(2、l0、5O和250wmol／L)处理对衰老心肌细胞的影响，通过检测 超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及微管相关蛋白1轻链 3(LC3)的变化来探讨白藜芦醇处理效应 产生的可能机制。结果：与对照组相比，衰老组(10g／LD一半乳糖处理48h)B一半乳糖苷酶染色阳性率明显增 加，B一半乳糖苷酶含量明显增加；SOD活性下降，MDA含量增加 ；LC3I1／LC3I水平下调；细胞活力无明显变化。 与衰老组相比，白藜芦醇处理组(10I~mol／L及50~mol／L)B一半乳糖苷酶含量明显降低；SOD活性升高，MDA含 量明显降低；LC3II／LC3I水平上调。结论：D一半乳糖诱导的心肌细胞衰老伴随着氧化应激的增强及 自噬水平的 下调；白藜芦醇能减轻D一半乳糖诱导的心肌细胞衰老的程度，其保护效应产生的机制可能与白藜芦醇抗氧化应 激效应及上调自噬水平相关。 [关键词] 心肌细胞；衰老；白藜芦醇；氧化性应激；自噬 [中图分类号] R363 [文献标志码] A d0i：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．12．006 ResveratrolreversesD ——galactose—-inducedsenescenceincardiomyocytes GUOHua—lei，LIAO Li—zhen，CHEN Yan—ling，WU Wei—kang (DepartmentofPathophysiology，ZhongshanSchoolofMedicine，SunYat—senUniversity，Guangzhou510080，China． E—mail：w2OO4wk@yahoo．con．ca) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectofresveratrolonagedcardiomyocytesinducedbyD—galactoseand theunderlyingmechanism．METHODS：DifferentconcentrationsofD—galactose(0，0．1，1，10and100g／L)were addedintotheculturemediumfordifferentprocessingtime(0，12，24，48and72h)toinducecardiomyocytesenescence． Cellsenescencewasindentifiedbysenescence—associatedB—galactosidasestaining．Cellviabilitywas evaluatedbyMrI-I assay．FDGmethodwasusedtodetectthequnatityofB—galactosidase．Theestbalishmentofthecardiomyocyteagingmod- elwasdeterminedaccordingtohteoutcomeofhtesedetections．Afte